50例急性早幼粒细胞白血病流式免疫表型结果分析.pdfVIP

鱼 壁垦堂窒查 !生 月第30卷第12期 IntJLabMed，17Wcember2009，v0lI．3o，Nn12 · 检 验 与 临 床 · 50例急性早幼粒细胞 白血病流式免疫表型结果分析 许艳丽 杜庆华 毛平 【摘要】 目的 骨髓细胞形态学分析是急性早幼粒细胞 白血病诊断的最主要依据 ，以颗粒增多 的早幼粒细胞粗颗粒型骨髓象 (M3a)多见。对于细颗粒型急性早幼粒细胞 白血病 (M3b)，尤其在光 镜下颗粒看不清楚、细胞核呈显著异形的骨髓象，流式细胞术的细胞免疫表型分析可辅助提供一定的 参考信息。方法 采用流式细胞术检测方法 ，运用 CD33、CD13、CD16、CD15、CD1lb、CD10、CD117、 HLA-DR、CD9等常用的荧光标志单抗 。对 5O例临床上已确诊 的急性早幼粒细胞 白血病进行细胞免 疫表型的回顾性分析 。结果 M3a和 M3b型AML流式 图谱有其共 同性的特征性群体分布 ，即 CD33阳性群体呈现荧光密度 明显增强 的、较均一 的细胞群 ；CD13荧光强度呈连续性 由弱到强分布； CD16、CD15、CD1lb荧光强度 明显下调甚至缺失 ；CD10抗原标志在此类型 白血病粒细胞群体 中均转 为阴性 ；CD117早期髓系标志在 46例病例 中为 阳性 ，HIA-DR在 8例病例 中有弱 阳性表达 ，CD9在 2O例病例 中为阳性 。对于 M3变异型 AML，其早幼粒群体有可能分布在原始细胞群 区域 ，即散射光 信号 (SSC)偏低 ，CD45呈弱 阳性或阴性 。结论 CD33、CD13、CD16、CD15、CD1lb、CD10、CD117、 HLA—DR、CD9等抗体对 M3有较高诊断价值 。异常的早幼粒细胞群体无论是粗颗粒型、细颗粒型还 是变异型，其流式 图谱均呈现上述荧光抗原标志强弱缺失、髓系分化受阻的典型表现 。可作为临床 的 参考依据 ，辅助诊断 。 【关键词】 流式细胞术 ； 免疫表型分型 ； 白血病 ，早幼粒细胞 ，急性 中图分类号 ：R730．43；R733．7l 文献标识码 ：B 文章编号 2009)12—1l94—02 利用流式细胞术进行 白血病 的免疫表型分析已是现代血 美 国eBioscience公司。FACSCanto流式细胞仪 (美 国BD公 液学诊断恶性血液病 、淋 巴瘤不可缺少的重要标准之一 。尽管 司)，配置 488及 633nm激光器 。 形态学诊断价值在临床不可替代 ，但在某些特殊类型的疾病如 3．样 品制备 每样 品管加肝素抗凝 的骨髓或外周血 形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源 的白血病 、形态学为 100 I(相当于 5×10个细胞)及 2O I荧光标志抗体 ，室温 急性淋巴细胞 白血病 、急性未分化白血病但缺乏特异性淋 巴细 避光孵育 2Omin；溶血素 2mL，室温避光孵育 10min，以离心 胞系列抗原标志 、混合性 白血病 、部分髓系白血病 、慢性淋 巴细 半径 8cm 300r／min离心 5min，弃上清 ，PBS洗涤 ；以离心半 胞白血病等 ，流式细胞术的免疫分型可提供重要参考信息。急 径 8cm 300r／min离心 5min，弃上清 ，500 LPBS悬浮沉淀 ， 性早幼粒细胞 白血病 ，形态学分类 以颗粒增 多的早幼粒细胞为 4℃待检 。 主 。某些细胞颗粒细小，似灰尘样 ，核扭曲折叠，易误诊为单核 4．流式细胞术分析 FACSCanto流式细胞仪 ，配置氩 细胞 。此时流式细胞术 的免疫分型可提供辅助鉴别 。现将 5O 离子激光器及氦 氖激光器 ，激发波长分别为 488和 633nm。 例急性早幼粒细胞 白血病病例流式 图谱进行 回顾性分析 ，报道 采用 cD45／ssc设 门方法 ，Diva软件分析 ，收集测定 细胞 如下 。 30000个 。抗体大于 20 为 阳性。免疫分型诊断标准参照文