TNF-α及LPS刺激下牙周膜干细胞IkB磷酸化及其下游基因的表达.pdfVIP

牙体牙髓牙周病学杂志(ChinJConservDent)2013，23(8) ·523· TNF—o【及 LPS刺激下牙周膜干细胞 IKB磷酸化及其下游基因的表达 刘大勇 ，周伟伟 ，高润涛 (1．天津医科大学 口腔医院牙体牙髓科，天津 306070； 2．首都医科大学附属北京友谊医院1：7腔科，北京 100050) [摘 要] 目的：研究TNF—Ot及LPS刺激下牙周膜干细胞IKB磷酸化及其下游基因的表达。方法 ：体 外分离、培养人牙周膜干细胞 ，分别在 10ng／mLTNF一 和500ng／mLEcoli．LPS刺激下进行培养，并于刺激培 养即时(0h)、5、30min和 1、2h，采用 WesternBlot法检测 IKBa总蛋 白和磷酸化 IKBa蛋 白的表达变化； Real—timePCR检测 IL一6、IL一8mRNA的表达水平。结果：牙周膜干细胞在 10ng／mLTNFo~或500ng／mLEcoli． LPS刺激下培养0～2h不同时间后 ，IKBoL总蛋白随刺激时间逐渐降低 ，1h时最低；磷酸化 IKBo(随刺激时间逐 渐升高，2h时最高；NFKB的下游基因IL一6及IL一8mRNA表达水平均随刺激时间逐渐升高，2h时升高最明显 (P0．05)。结论 ：炎症细胞因子TNF一0I或LPS均可促进牙周膜干细胞中IKBot蛋白的磷酸化 ，并上调 IL一6、 IL一8mRNA的表达；提示 NFKB信号通路的活化可能是导致炎症状态下牙周膜干细胞功能损害的重要因素。 [关键词]肿瘤坏死因子 Ot；脂多糖；核因子KB；牙周膜干细胞；牙周炎 [中图号]R780．2 [文献标识码]A [文章编号]1005—2593(2013)08—0523—05 [牙体牙髓牙周病学杂志，2013，23(8)：523] Ph0sph0rylati0n 0fIKB andtheexpressionofdownstream genesinTNF—o【orecoli．LPS stimulated periodontalligamentstem cells LIU Da-yong ，ZHOU Wei—wei，GAO Run—tao (DepartmentofEndodontics，SchoolofStomatology，TianfinMedicalUniversity，Tianjin300070，China) [Abstract] AIM：ToinvestigatephosphorylationofIKBandtheexpressionofdownstreamgenesinTNF一 orEcoli．LPSstimulatedperiodontalligamentstemcells(PDLSCs)．METHODS：HumanPDLSCswEerculturedand stimulatedbyrecombinanthumanTNFaat10ng／mLandEcoli．LPSat500ng／mLrespectively．WesternBlotanalysis wasusedtodetectthetotalproteinandthephosphorylatedproteinofIKBo~．real-timePCRwasusedtodetectIL-6and IL一8mRNA expression．RESULTS：10ng／mLTNFc~or500rig／mLEcoli．LPSdecreasedthetotalprotein，increased thephosphorylatedproteinofIKBo~andincreasedL——6andIL—-8mRNA expressiontime——dependentlyin0—-2hex