反相高效液相色谱法及电喷雾离子阱质谱法分析中药复方制剂肾宝片.pdfVIP

维普资讯 第 32卷 分折化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 12期 2004年 12月 ChineseJournal ofAnalyticalChemistry 1603～1607 反相高效液相色谱法及 电喷雾离子阱质谱法分析 中药复方制剂 肾宝片 屠 颖 赵陆华 朱 林 王广基 相秉仁 单 臻 (中国药科大学分析中心 ，南京 210009) 摘 要 建立了一种反相高效液相色谱梯度洗脱 ，以检测波长切换方法，同时测定中药复方制剂 肾宝片中5 种主要成分的含量。采用AlltimaC。柱 ，以乙腈一水为流动相 ，用检测波长切换法 ，将 5种主要成分分离测定， 并采用高效液相色谱与电喷雾离子阱质谱 (MS)联用，成功分离和鉴别了该制剂 中的20种成分 。本文建立 的方法简便、灵敏、准确、可靠 ，可用于中药制剂肾宝片的质量控制。 关键词 反相高效液相色谱法，电喷雾离子阱质谱法 ，肾宝片，淫羊藿，补骨脂 1 引 言 中药复方制剂肾宝片是由淫羊藿、补骨脂、蛇床子等22味中药材 ，采用现代中药提取分离技术 ，精 致而成的薄膜衣片剂。临床上主要用于调和阴阳，温阳补肾，安神固精 ，扶正固本 ，主治 阳痿 ，遗精 ，腰腿 酸痛，精神不振，夜尿频多诸症。目前，有关中药材或中药小复方制剂 中淫羊藿苷、补骨脂素、异补骨脂 素及蛇床子素的含量测定文献报道较多 ¨“，但大多只测定组方中一种或两种成分。而由20味以上药 材制成的中药大复方制剂中多组分的同时测定尚未见文献报道。中药大复方制剂成分复杂 ，成分间相 互干扰大，既使采用等度洗脱也较难 同时测定中药复方制剂中多种成分。本研究建立了RP—HPLC—UV 梯度洗脱 ，检测波长切换方法同时测定了中药大复方制剂肾宝片中的5种主要成分 ，方法简便 、灵敏 、准 确、可靠。采用离子阱质谱中的碰撞诱导解离(CID)选择合适前体母离子 ，进行了三级质谱的分析 ，成 功鉴别了该制剂中的20种成分 ，其中19种为文献报道的已知化合物 ，1种为未知新化合物。 2 实验部分 2．1 仪器和试药 日本岛津高效液相色谱仪 (包括 LC-10ADVP二元泵 ；SPD-10AVP紫外-可见检测器)；N2000色谱 工作站 (浙江大学智能信息工程研究所)；安捷伦 1100高效液相色谱系统(包括在线真空脱气机 ，四元 泵 ，二极管阵列检测器 ，自动进样系统)；安捷伦 1100质谱仪 (包括电喷雾离子源；离子阱质谱检测器)； 安捷伦 Rev．A．09．01化学工作站；PE-Lamda紫外分光光度计。乙醇为分析纯 ；水为二次重蒸水 ；乙腈 为色谱纯。淫羊藿、补骨脂、蛇床子等 22味药材 (南京同仁堂大药房)；淫羊藿苷，补骨脂素 ，异补骨脂 素及蛇床子素标准品(中国药 品生物制品检定所 ，批号分别为：0737．200111、739-9402、738-9404、0822． 200003)；淫羊藿次苷-ll(中国医学科学研究院植物化学研究所)；’肾宝片(中国药科大学 中药学院，批 号 020701、020702、020703)。 2．2 实验条件 2．2．1 液相色谱条件 色谱柱 ：AlltimaC18ODS柱 (250mmx4．6mm，5Ixm)；流动相 ：乙腈．水 ，在 10min内由24：76(v／v)变为30：70；在 10～40rain内变为50：50；在40～50rain内变为70：30，恒定 10 min；流速：1．0mL／min；进样量 20IxL；柱温25℃；检测波长 ：0～30min(270rim)，30～34rain(245rim)， 34～50min(270rim)，50～60min(325rim)。 2，2，2 质谱条件 离子源 (ESI)喷射 电压：3．50kV；雾化器 (N )压力：174kPa；干燥气 (N )流速 ： 8L／min；干燥气温度 ：325~C；锥体 电压 ：40V；毛细管输出电压 ：94V；离子扫描范围：100～1200m／z；光 2003—12-19收漪 ；2004-08—20接受 本文系国家高科技研究发展计划 (863)基金资助项 目(No．20