番木瓜果肉RNA提取方法的比较.pdfVIP

维普资讯 亚热带农业研究 第4卷 第3期 SubtropicalAgricultureResearch 2008年 8月 番木瓜果肉RNA提取方法的比较 林 莹 ，陈晓静 (1．漳州师范学院生物系，福建 漳州363000；2．福建农林大学园艺植物 遗传育种研究所，福建 福州 350002) 摘要：为了从成熟末期的番木瓜果肉中提取纯净完整的KNA，本试验采用了TRIzol试剂盒、改良TRIzol、SDS法、CTAB法等 4种方法从番木瓜果实中提取总RNA。从 RNA的完整性、产率和纯度等方面对这几种方法进行 比较和评价，结果表明，采 用改良TRIzol所得RNA完整性较其他方法好，条带清晰无明显降解，28S和18SRNA的亮度比约为2：1，D260／D280达1．9且 得率较高，为380．5粥 ·g～，经RT—PCR后得到一特异条带表明该 RNA可用于后续分子生物学操作。 关键词：番木瓜果实；RNA提取 ；改良TPdzol；RT-PCR 中图分类号：S661．6 文献标识码：A 文章编号：1673-0925(2008)03-0229-04 ComparisonofmethodsforRNA extractionfrom papayafruit LINYing ，CHENXiao-jing2 (1．DepartmentofBiology，ZhangzhouNormalUniversity，Zhangzhou，Fujian363000，China；2．InstituteofHorticultural GeneticsandBreeding，FujinaAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，F~ina350002，China) Abstran：Inordertoextr~tpurena dintegrateRNAfrom papayafruit，whichcontainsrichsecondarymetabolites，theTRIzol，im。 provedTRIzol，SDSandCTABmethodsforRNA extractionwel℃compared inthispaper．Accordingtotheintegrity，productivity andpuriytofextractedRNA，the improvedTRIzolmethodwasthemostappropriatemehtodofRNAextractionforpapayafruit．Com- paredwiht theohterthreemehtods，theRNAbandsfrom thismehtodwereclearwihtoutdegradation．Wiht thismehtod ，hteratioof htebrightnessof28SRNAtohtatof18SRNAwasapproximately2：1， I瑚 was1．9，andyieldoftotalRNA380．5p．g ·g～。 AfterRT-PCR，aspecificbandwasobtained，indicatingthe extractedRNAcanhe usedforhtefollowing-upmolecularbiologyoper- ations． Keywords：papaya(cc 口papayaL．)；RNAextraction；improvedTRIzulmethod；RT-PCR 从植物中提取高质量的总RNA是顺利进行 RT—PCR、Norther杂交、eDNA文库构建、mRNA差异显示 (mRNADDRT—PCR)…等各种分子生物学研究的基础。目前常用于植物材料RNA提取的传统方法有异