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ELISA实验前的注意事项 为了帮助您更好地解决在实验中可能碰到的各种问题，我们设计了这些问题指导，配以试剂 盒内的说明书一起供您参考使用。如果您在实验中遇到任何暂时无法解决的特殊问题，敬请咨询 027，我们将热情为您服务。很多因素都将导致免疫测定实验的失败，而大多数技术 失误是可以通过全面阅读和准确理解说明书以及实验步骤来避免的。若对试剂盒内的说明书有任 何意见和建议，欢迎反馈 027我们期待听到您的声音，从而完善我们的产品，更好 地为您服务。 ◆ 仔细阅读说明书 ◆ 检查试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期，请勿使用。 ◆ 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积） ◆ 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。 短期内无法实验者，注意低温保存 ◆ 准备好所有实验额外所需物品， （比如移液器，试管，清洗器，酶标仪） ◆ 按说明书将所用试剂平衡至室温，根据检测标本数量确定所需试剂的量 ◆ 检查试剂盒内每种试剂的贮存条件，保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储。 ◆ 检查不稳定或者变质的试剂溶液 （比如沉淀或变色）。有些试剂，比如标准品稀释液或者检 测稀释液，可能在设计时就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板之前，必需充分混匀。而由 于沉淀物的特性，在加入酶标板之前，必需不停搅拌。 ◆ 保证充分的孵育时间和温度。 ◆ 切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。 ◆ 在混合或溶解蛋白溶液时，避免泡沫产生。 ◆ 在实验开始之前，安排好实验流程。 ◆ 在实验开始之前，清洁工作台。 ◆ 若有问题，应与我公司或代理商的技术支持联系 洗板方法（Washing Techniques ） 任何一个成功的ELISA检测，正确的洗板方法是非常关键和重要的一方面。连贯的洗板也是 很有必要的。在稀释浓缩洗涤液时，请使用去离子水或者蒸馏水。 ◆ 洗涤瓶或多通道移液器 保证洗瓶内压强良好或者移液器的管头被适当调整并且无碎屑。检查板内的板条是否安放完 好。将板条编号以防在倾泄的时候松动便于调整。首先，倾泄酶标板以清空内容物。根据试 剂盒内推荐的体积向每孔内滴加洗液。若实验步骤中要求浸泡，则定时将每孔浸泡完全。将 板内液体倾倒完全，用干净纸巾擦拭。按照说明书所示重复以上步骤。最后一次洗板之后， 将板内液体倾倒完全，用干净纸巾拍打表面并擦干。切勿让孔内干燥。按照试剂盒内说明书 迅速进行下一步实验操作。 ◆ 自动洗板仪 将自动洗板仪接入适当真空（根据制造商的说明）。确保每管都被适当抽吸。首先，通过抽 吸或者倾倒将板清空。根据试剂盒内推荐的体积向每孔内滴加洗液。若实验步骤中要求浸泡， 则定时将每孔浸泡完全。完全抽吸各孔，保证没有洗液残留。在孔内液体被完全抽走之后不 要再将装置至于孔内过分抽吸。按照说明书所示重复以上步骤。最后一次洗板之后，将板内 液体倾倒完全，用干净纸巾拍打表面并擦干。切勿让孔内干燥。按照试剂盒内说明书迅速进 行下一步实验操作。 移液注意事项 ◆ 反复而准确移液的关键是连贯的操作。流畅而迅速的移液操作是非常重要的。吸液和释放液 体是都要避免剧烈的移动。 ◆ 检查枪头大小是否合适，是否固定完好。 ◆ 在滴加样品或试剂时，每次更换枪头。 ◆ 请勿转移小于移液器生产厂家推荐的最小体积的液体。否则将会降低实验的准确性和重复 性。 ◆ 某些液体易于附着在枪头的内外表面上，所以，最好预先洗涤枪头以避免由于这种表面张力 而引起的液体体积变化。这样会增加移液的准确性。 ◆ 若果需要移动的液体是粘稠的，在吸取液体时，请在待取液体中停留一段时间，待体积达到 平衡后再移出。 ◆ 用移液器吸取液体之后，用不含棉的绒纸片擦干枪头的外表面。 ◆ 在吸取液体时枪头内如果出现气泡，排出已吸液体并重新从容器中缓慢吸取一次。如果枪头 内依然出现气泡，则更换枪头。 ◆ 在吸取液体时枪头内如果出现泡沫，则轻微倾斜移液器，并缓慢吸取液体。 ◆ 每种试剂均分开配制贮存 样本信息（Sample Information ） 我能否在实验开始前一天收集样品？ ◆ 除非试剂盒内说明书特别说明不允许，一般都可以。如果收集的样品不能够及时进行检测， 请保存至-20℃或者按照说明书进行保存。应避免反复冻融。 ◆ -20℃是推荐的冷藏保存温度。解冻的平衡过程可能会导致样品的降解。 我是否必需按照试