应用血球计数板检测灵芝破壁孢子粉破壁率的研究.pdfVIP

维普资讯 食用菌学报 2005．12(2)：37--40 ActaEdulisFungi 文章编号：1005—9873(2005)02—0037-04 应用血球计数板检测灵芝破壁孢子粉破壁率的研究 尚晓冬，李明容，王 南，谭 琦 (农业部食用菌产品质量监督检验测试中心(上海)；农业部食用菌遗传育种重点开放实验室； 上海市农业遗传育种重点实验室；上海市农业科学院食用菌研究所，上海201106) 摘 要：灵芝孢子粉称样量与孢子计数(血球计数板法)的回归分析结果表明，两者显著相关。 在此基础上建立了灵芝破壁孢子粉破壁率的检测方法。破壁率48．9％的标准样品，日内相对标准 偏差(RSD，n=14)为10．34％，回收率(mean±SD，n=14)为94．9％±9．81％；破壁率68．8％、 80．0％和90．6％的标准样品，Et内相对标准偏差(RSD，n=10)分别为4．14％、3．43％和2．22％，回 收率分别为101．2％±4．2％、98．76％±3．39％和99．73％±2．21％(mean±SD，n=10)。 关键词：灵芝；破壁孢子粉；破壁率；血球计数板 中图分类号：S567．31；TS207．3 文献标识码：A 灵芝 [Ganodermalucidum (Leyss．ex．Fr．)Karst]是我国传统医药宝库中的一朵奇葩。 研究表明，灵芝在增强机体重要器官、组织的功能和协调提高各系统适应内外环境变化的能力 方面发挥 扶“正固本”的作用，对慢性支气管炎、冠心病、心绞痛、高血脂、高血压、神经衰弱、白 细胞减少、肝炎及肿瘤均有一定的辅助疗效¨’。 破壁灵芝孢子粉由灵芝担孢子经破壁处理而成。灵芝担孢子褐色，卵形，外壁平滑，无色， 内壁有瘤状突起，基部平切，8．5～11．5×5～6．5(7～8)mL3J。观察发现，破壁孢子粉在显微 镜下呈三种形态：完全破壁(孢子完全丧失原有的卵形形态，仅见大小不一的孢子碎片)，不完 全破壁(卵形孢子不再完整，但缺损程度大小不一)，未破壁(孢子基本保持其卵形形态，未见明 显缺损)。经破壁处理，灵芝孢子中的还原性糖和多肽等化学成分更容易被提取出来，破壁孢 子粉的醇提取液也比未破壁孢子粉的具有更强的体外抗肿瘤活性 J。因此，破壁率常被认为 是衡量灵芝破壁孢子粉质量的重要指标之一。但有关破壁率的检测方法目前尚未见报道。血 球计数板适用于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产孢子的计数 。本文介绍了用血球计 数板检测破壁灵芝孢子粉破壁率的方法。 1 材料与方法 1．1 供试材料 灵芝孢子粉(未破壁)及破壁孢子粉由上海市农业科学院食用菌研究所提供。 收稿日期：2004—08—20原稿；2004—12—03修改稿 作者简介：尚晓冬(1973一)，男，1999年毕业于南京农业大学植保系，硕士，助研，主要从事食用菌遗传研究，发表主笔 论文4篇。 维普资讯 食 用 菌 学 报 12卷 1．2 试验方法 #豁 11cT1 cT10 -I。 ．∞0c 。0盆 1．2．1 孢子计数及标准曲线绘制 精确称取0．0056、0．0104、0．0146、0．0205、0．0268、0．0490、0．0721、0．0839g灵芝孢子粉， 蛊I ∞ 加 三【 m O O O O O O 0