采供血机构上岗证复习材料 远程教育第三场册.pptVIP

○ 7.1介绍 血型血清学技术相对简单，但责任重大。患者或鉴定的错误或配血不合的失误能给患者带来最严重的影响，甚至能引起死亡。因而准确的理解本章所描述的原理是非常必要的。 为了便于参考，整个第七章所描述的技术被收录在附录1中： 1 洗涤细胞和制备红细胞悬液 2 玻片（瓷片）技术 3 立即离心（IS）技术 4 盐水室温技术 5 用于 Rh 鉴定的白蛋白加入技术 6 试管法 ABO和Rh鉴定 7 微量板法ABO和Rh鉴定 8 Du 型试验 9 间接抗球蛋白试验（IAT） 10 低离子强度的间接抗球蛋白试验（LISS/IAT） 10．1悬液法 10．2加入法 11 直接抗球蛋白试验（DAT） 12用于抗球蛋白试验质控的IgG致敏细胞的制备 13 配血 13．1一管法配血:立即离心和IAT法 13．2 使用LISS的一管法配血 13．3 使用白蛋白和室温盐水技术的配血 13．4紧急配血 ○ 7.2 健康和安全 所有处理血样本或任何其它生物材料是一种对健康的潜在危害。因而需确保个人卫生健康的高标准，并且要完全清楚怎样处理生物材料的溢出和污染的实验仪器。 实验室的安全详细描述是在导言册的第三章，在使用你的操作技术程序前必需仔细阅读和理解这些内容。 ○ 7.3器材 以下列出常规血型血清学实验所必需的最低限度的仪器（见63页图23） 7.4盐水 在红细胞实验中所用的盐水 非常重要。其pH应在6.5-7.5之间。超出这个范围某些抗体不能与对应的抗原结合，而呈假阴性结果。如果在这个范围内且当天使用则不需要缓冲液。 然而，大部分盐水使用周期超过2~3天，在贮存期内pH下降，必需加入一些缓冲盐，可用pH7 的缓冲药剂或加入缓冲溶液。 7.5 巴斯德吸管 在血型鉴定中使用最普通的仪器是巴斯德吸管，这是一支5mm玻璃管拉长成的尖管，可以滴下容积约0.02ml 。 操作规程： （1）总是持同样的角度以确保你不断地得到同样容积 的液滴。 （1）?可能每个新样本应使用干净的吸管。 （2）??正确洗涤吸管： n???????? 在一烧杯水中冲洗吸管,将水甩掉 n????????在一烧杯盐水中冲洗吸管,将盐水吸入吸管,然后将盐水甩掉。 n???????? 再用干净的盐水冲洗一次，甩掉 7.6玻片、试管和微量板 鉴定血型有三种主要方法： n???????? 玻璃片或白色瓷片法 n???????? 试管法 n???????? 微孔板（微量板）法 玻璃片或白色瓷片技术 （见附录1中的技术2 ）不敏感并可能导致错误，因而它仅在用试管或微量板技术进行完全血型鉴定前做单一的细胞血型。 试验试管 试验试管由玻璃或塑料制造，用于血型分型的试管尺寸通常为50×7mm，而用于抗求蛋白试验通常为75×12mm试管。试管技术的优点是允许长时间的孵育而试管内容物不会脱水。再次使用之前应彻底清洁试管，可通过良好的洗涤，蒸馏水冲洗和干燥试管来完成。 微孔板和微量板 微量板在许多试验室里正迅速地替代试管。它是由96个小孔组成的小盘。每个孔里能放入200到300微升的试剂，如65页图24所示。 底部形状，有三种类型： V型孔、平底孔、U型孔。红细胞血清学试验通常用U型孔，因为它易于读结果。 优点是一个微量板能够做96个试管所做的工作，可使用较少的抗血清，因而在费用上通常是合算的。 缺点：不易清洗。应避免用同一块板做不同的试验，方法是今天在这个孔中加入抗A，明天同一孔中加入的仍然是抗A。 7.7 阅读结果 玻片和瓷片技术 在2cm直径的区域内混合血清和细胞，然后轻轻地振摇玻片或次片，观察凝集。在两分钟内阅读结果，否则由于试剂干燥而呈现假阳性反应。 试管技术 让细胞沉到试管底部，除非试管轻度离心，否则需45分钟。一次拿一个试管放在白色背景的仪器上，如一个带扩散光的灯箱或一面凹透镜。观察溶血现象，如果有记下结果。 以一定角度握住试管，轻轻摇动使细胞从底部脱离下来，观察凝集情况，如使用手提透镜（×2或×5）将很容易阅读结果。在观察下一个试管前立即记下结果。 ○微量板技术 与试管技术相似，细胞自然沉淀或慢速离心均可。观察溶血然后轻轻地摇动使细胞从底部脱离下来，可使用微量板振荡器或用手掌轻轻敲板的边缘。反应能直接阅读或借助于微量板阅读透镜。有其它方法阅读微量板上的