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分析化学教研室 第9章 色谱法概论 （Chromatography） 色谱法(chromatography)也称之为色层法或层析法，是一种物理或物理化学分离分析方法， 目前在生命科学的研究，临床诊断，病理研究，法医鉴定，药物的研究开发，质量控制等领域被广泛应用。 第1节 色谱法的起源、历程及分类 一、色谱法的起源 俄国的植物学家茨维特(M.Tswett)于1903年首次提出色谱法。 1903年3月21 日茨维特 Tswett（1872-1919）在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“ 一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文，介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法 Tswett把分离后由不同颜色构成的色带叫做“色谱” ， 二、色谱法的历程 在Tswett提出色谱概念后的20多年里没有人关注这一伟大的发明。直到1931年德国的Kuhn和Lederer才重复了Tswett的某些实验，用氧化铝和碳酸钙分离了α-，β-，和γ-胡萝卜素，此后用这种方法分离了60多种这类色素。 Martin和Synge在 1940年提出液液分配色谱法，即固定相是吸附在硅胶上的水，流动相是某种有机溶剂。 色谱法就是根据组分在流动相和固定相中分配行为的不同进行分离和分析的方法 1941年Martin和Syngee提出用气体代替液体作流动相的可能性，11年之后James和Martin发表了从理论到实践比较完整的气液色谱法，因而获得了1952年的诺贝尔化学奖。在此基础上，1957年Golay开创了毛细管柱气相色谱法 1956年Van Deemter等在前人研究的基础上发展了描述色谱过程的速率理论，1965年Giddings总结和扩展了前人的色谱理论，为色谱的发展奠定了理论基础。 1944年Consden等就发展了纸色谱，1949年Macllean等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄层板使薄层色谱法（TLC ）得以实际应用，而在1956年Stahl开发出薄层色谱板涂布器之后，才使TLC得到广泛地应用。 在60年代末把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱，出现了高效液相色谱（HPLC）。 而在80年代初由Jorgenson等集前人经验而发展起来的毛细管电泳(CE)，在90年代得到广泛的发展和应用。同时集HPLC和CE优点的毛细管电色谱在90年代后期受到重视。 我国在色谱分析领域的研究起于1954年，由中国科学院大连化学物理研究所首先开发。经过几十年的努力，我国色谱基础理论研究和应用技术研究方面具有特色，居世界先进行列。 三、色谱法分类 按流动相和固定相的状态分类 流动相 固定相 液体 液体 液体 固体 气体 液体 气体 固体 液－液色谱 液－固色谱 气－液色谱 气－固色谱 液相色谱 气相色谱 2.按分离机理分类 键合相色谱法（bonded phase chromatography） 毛细管电泳法（capillary electrophoresis） 毛细管电色谱法（capillary electro-chromatography） 吸附色谱法（adsorption chromatography） 分配色谱法（partition chromatography） 空间排阻色谱法（steric exclusion chromatography） 离子交换色谱法（ion exchange chromatography） 3.按操作形式分类 柱色谱法 经典的液相柱色谱法 气相色谱法 高效液相色谱 平面色谱法 薄层色谱法 纸色谱法 4.按使用目的分类 分析用色谱 制备用色谱 流程色谱 分离效率高 分析速度快 检测灵敏度高 四、色谱法的特点： 样品用量少 选择性好 应用范围广 定性能力较差 第2节 色谱过程与术语 一、色谱过程 　色谱过程是物质分子在相对运动的两相间分配“平衡”的过程。混合物中，若两个组分的分配系数不等，则产生差速迁移，最终被分离。 二、色谱图与色谱峰 由检测信号强度对时间作图所绘制的曲线称为色谱流出曲线 ，又称为色谱图。 流出曲线上的突起部分称为色谱峰。 正常色谱峰为对称形正态分布曲线。 一个组分的色谱峰可用三项参数说明： 峰高或峰面积(用于定量) 峰位(用于定性) 峰宽(用于衡量柱效) 根据色谱图中色谱峰的个数，可以判断试样中所含组分的最少个数。 三、常用术语 1．基线 在操作条件下，没有组分流出时的响应信号 稳定的基线应是一条平行于横轴的直线。基线反映仪器的噪音随时间的变化（稳定性）。 2．峰高 色谱峰最高