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医学免疫学创新性实验 -----伤寒沙门菌多克隆抗体的制备 实验目的： 1. 学习家兔、小鼠的免疫方法，饲养技术，观察其主要的免疫器官； 2. 学习采集血液的技术和制备血清的方法； 3. 学习并利用肥大氏反应检测血清中抗体的效价的方法。 实验原理： 1. 灭活伤寒沙门菌注入动物体内后，作为异物抗原，将刺激免疫系统，由B细胞产生多克隆抗体。 2. 抗原和抗体在体内外均可以发生特异性结合，可利用肥大氏反应检测动物血清中伤寒沙门菌抗体的含量。 实验材料： 1. 新西兰雄性大白兔共16只，2只/班，昆明鼠48只，6只/班 2. 灭活伤寒沙门菌 3. 注射器（免疫用、采血用）、碘酒酒精棉球等 4. 肥大氏反应用实验材料 一、大白兔耳缘静脉免疫方法 1. 将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去，并用酒精棉球消毒。 2. 用2ml注射器吸取1ml （初次0.5ml）伤寒沙门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。 3. 每周免疫1次，连续3-4次。 注意：先自耳缘静脉远端注射。 二、大白兔皮内免疫方法 先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒。 用2ml注射器吸取1ml伤寒沙门菌液进行皮内注射，共4-6点，每点大约0.2ml。 3. 每周免疫1次，连续3-4次。 三、小鼠腹腔免疫方法 1.用左手抓取小鼠固定，消毒腹部皮肤。 2.用1ml注射器吸取伤寒沙门菌0.2ml进行腹腔注射。 3.每周免疫1次，连续3-4次。 四、兔标记方法： 1班：剪去头左侧毛 2班：头右侧 3班：脖左侧 4班：脖右侧 5班：腹左侧 6班：腹右侧 7班：臀左侧 8班：臀右侧 五、进行实验记录： 包括实验名称 指导教师 年级专业 参加实验学生 整个实验过程 意见和建议 二、大白兔皮内免疫方法 1.先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒。 2.用2ml注射器吸取1ml伤寒沙门菌液进行皮内注射，共4-6点，每点大约0.2ml。 3. 每周免疫1次，连续3-4次。 * * 进行实验记录： 包括实验名称 指导教师 年级专业 参加实验学生 整个实验过程 意见和建议 兔标记方法： 1班：剪去头左侧毛 5班：剪去腹左侧毛 一、大白兔耳缘静脉免疫方法： 1.将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去，并用酒精棉球消毒。 2.用2ml注射器吸取1ml（初次0.5ml）伤寒沙门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。 3.每周免疫1次，连续3-4次。 注意：先自耳缘静脉远端注射。 * *