海水粪大肠菌群检测操作规程.pdfVIP

技能实训海水中粪大肠菌群数的检测

一、技能目标

1.掌握多管发酵法测定水中粪大肠菌群的技术；

2.掌握水中粪大肠菌群检测结果的报告方式。

二、实训器材

1.仪器设备

高压蒸气灭菌器、恒温培养箱。

2.培养基

乳糖蛋白胨培养液（内有小套管）、EC培养液。

3.用品及试剂

载玻片、酒精灯、接种环、培养皿（直径9cm）、试管、刻度吸管、烧杯、锥形瓶、采样瓶、革兰氏

染色液等。

三、技能操作

1.采集水样

用事先准备好的无菌玻璃采样瓶采集所需的水样。根据水样的量，按100mL水样加1mL吐温溶液，

充分摇匀。

2.检测水样

本实训参照GB∕T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》、《海滨浴场环境监测技术规程》、《海水增

养殖区监测技术规程》、《海洋生物质量监测技术规程》、《海洋生态环境监测技术规程》等相关资料进行操

作。

（1）初发酵试验

检验海水水样时，取10mL水样接种到10mL双料乳糖蛋白胨培养液，接5管；再用1mL灭菌移液管，

等量吸取1mL水样，分别加入5支各盛有10mL灭菌的乳糖蛋白胨培养液；以无菌操作法吸取1mL水样

注入盛有9mL灭菌陈海水的试管内混匀得到稀释10倍的水样，再取一支1mL灭菌移液管，等量吸取1mL

稀释10倍的水样，分别加入5支各盛有10mL灭菌的乳糖蛋白胨培养液。

将上述15支试管充分混匀后，放入44℃恒温培养箱中培养24h。如各发酵管都不产酸产气，则报告

为粪大肠菌群阴性；如有产酸产气者则按下列步骤进行实验。

（2）复发酵试验

经培养24h后，产酸产气及产酸不产气的初发酵管，用接种环接种到EC培养液，置44℃恒温箱内培

养24h，观察有产气者，即可报告为粪大肠菌群阳性。

3.结果与报告

根据复发酵试验中粪大肠菌群阳性的管数，查表9-12，得到每100mL（g）粪大肠菌群最近似值数。

将此数值乘以10，则为每1L水样所含的粪大肠菌群最近似值。并根据国家规定标准，评判所测水样的质

量。

表9-12用5管10mL，5管1mL，5管0.1mL时的MPN

出现阳性份数每100mL中出现阳性份数每100mL中

10mL×5管1mL×50.1mL×5粪大肠菌群10mL×51mL×50.1mL×5粪大肠菌群

管管数的最近似管管管数的最近似

值值

00023008

001230111

002430213

003530316

004730420

00593