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第62页,共99页,星期日,2025年,2月5日有关变性的机制人们作了大量的研究。一般认为,蛋白质的二级、三级结构的改变或遭到破坏都是变性的结果。若破坏三级结构,则可能只引起可逆的变性;若破坏二级结构,则会引起不可逆的变性。但不会破坏蛋白质的一级结构。蛋白质的可逆和不可逆变性作用,在生命过程中起着非常重要的作用。因为蛋白质变性时,其亲水性以及其它相互作用的能力也发生变化。如随着肌体的老化(衰老),蛋白质便逐渐极缓慢的变性。因此,积极研究和防止蛋白质变性(衰老)的过程,是当今科学家的重大任务之一.第63页,共99页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的水解第64页,共99页,星期日,2025年,2月5日15.6酶是具有催化作用的蛋白质,在生命过程中起着重要的作用。第65页,共99页,星期日,2025年,2月5日溶菌酶模型第66页,共99页,星期日,2025年,2月5日第67页,共99页,星期日,2025年,2月5日第68页,共99页,星期日,2025年,2月5日第69页,共99页,星期日,2025年,2月5日第70页,共99页,星期日,2025年,2月5日4.肽结构的测定n种不同的氨基酸形成多肽时有n!种不同排列方式,要研究肽及由肽组成的蛋白质,应该首先研究肽的结构。这须解决三个问题:组成肽的氨基酸的种类;肽中各种氨基酸的相对比例和含量;各氨基酸在肽链中的位置(排列方式).解决方法:测定多肽的分子量(用超离心法、渗透法和X-衍射法等);彻底水解肽链,通过层析和鉴定得知各种氨基酸的比例、含量;通过以上方法,可以得知多肽的分子式。第30页,共99页,星期日,2025年,2月5日3)端基分析测定各氨基酸的排序。选择性水解:许多蛋白质水解酶通常只能水解一定的肽键,具有高度的专一性,故可以利用不同的蛋白质水解酶来水解不同的肽键。如胰蛋白酶专门水解赖氨酸或精氨酸的羧基形成的肽键,因此用它催化水解某一多肽,得到的肽链的C-端将肯定是赖氨酸或精氨酸。C-端分析:多肽可以在各种肽酶催化下使C-端水解。N-端分析:2,4-二硝基氟苯(Sanger试剂)与多肽的N-端反应。第31页,共99页,星期日,2025年,2月5日5.肽的合成肽的合成即使各种氨基酸按照一定的次序形成肽键。须解决:官能团羧基和氨基的活化,使之能在温和条件下反应;将两个官能团的一个保护起来,使另一个去反应构成肽键。第32页,共99页,星期日,2025年,2月5日15.5蛋白质蛋白质部分水解后得多肽,有些蛋白质本身就是多肽。蛋白质与多肽的关系与多糖和低聚糖类似,相对分子量大的叫蛋白质,小的称多肽,但无严格界限。通常,将Mw10000的称为蛋白质,Mw10000的叫做肽。蛋白质与肽的差别是蛋白质有稳定的构象,而小肽一般只在发挥作用时才在溶液中形成一定的构象。蛋白质的组成和分类蛋白质是含氮高分子,人体内有10万种以上的蛋白质。占人体干重的45%.蛋白质的组成大致为:C:50~55%,H:6~7%,O:19~24%,N:15~17%1克N相当于6.25克蛋白质,则:W(蛋)=6.25WN第33页,共99页,星期日,2025年,2月5日蛋白质种类繁多,结构多样,故分类方法也不少。主要是依据蛋白质分子的某一特征来分类的。1)根据蛋白质的形状纤维蛋白:如丝蛋白,角蛋白等;球蛋白:如蛋清蛋白、酪蛋白等。2)根据化学组成单纯蛋白。它是由多肽组成的,其水解的最终产物为a-氨基酸.如白蛋白、球蛋白和谷蛋白等;结合蛋白。是由单纯蛋白和非蛋白质部分组成的,非蛋白质部分称为辅基。依据辅基之不同又可分为脂蛋白、糖蛋白、磷蛋白、色蛋白、核蛋白、金属蛋白及血红蛋白等;3)根据功能分活性蛋白:起催化作用的叫酶;起调节作用的称激素;起免疫作用的叫抗体等;非活性蛋白:主要包括一大类担任生物的保护或支持作用的蛋白质.不具生物活性,如储存蛋白和结构蛋白等。第34页,共99页,星期日,2025年,2月5日2.蛋白质的结构1)一级结构第35页,共99页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的一级结构:指的是肽键连接起来的多肽链中,氨基酸的排列次序。任何蛋白质都有其特定的氨基酸排列次序。有的由一条肽链组成;有的由二条或多条肽链组成。人工
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