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山东省肠道微生态诊疗技术规范

肠道微生态诊疗技术是通过调节肠道菌群平衡，改善宿主健康状态的系统性医疗手段。本规范基于循证医学证据，结合山东省居民肠道微生态特征及临床实践需求，对肠道微生态诊疗的全流程进行规范化指导，涵盖临床评估、检测技术、干预措施、疗效评价及质量控制等核心环节。

一、临床评估规范

临床评估是肠道微生态诊疗的首要环节，需通过多维度信息收集明确菌群失调的潜在诱因、临床表现及宿主健康状态。

（一）病史采集

1.基础病史：详细记录患者年龄、性别、民族、居住区域（区分城市/农村、沿海/内陆）、职业等基本信息。重点关注消化系统疾病史（如炎症性肠病、肠易激综合征、结直肠癌）、代谢性疾病史（如糖尿病、肥胖、非酒精性脂肪肝）、免疫相关疾病史（如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮）及精神心理疾病史（如焦虑症、抑郁症）。

2.用药史：完整采集近1年抗生素使用情况（包括种类、剂量、疗程、频率），特别注意广谱抗生素（如三代头孢、碳青霉烯类）及长期小剂量抗生素（如用于痤疮治疗的四环素类）的使用；记录益生菌/益生元/合生元制剂的使用情况（菌株类型、剂量、疗程）；关注免疫抑制剂（如环孢素）、质子泵抑制剂（如奥美拉唑）、泻药（如聚乙二醇、番泻叶）等可能影响肠道菌群的药物使用史。

3.生活方式：评估饮食结构，包括每日膳食纤维摄入量（推荐通过24小时饮食回顾法量化，山东省居民平均每日膳食纤维摄入约15-20g，低于推荐量25-30g）、动物蛋白/脂肪占比、乳制品摄入频率（如传统发酵乳制品如酸浆豆腐的食用情况）；记录吸烟（包年数）、饮酒（类型及日均摄入量）、睡眠质量（入睡时间、夜间觉醒次数）及运动习惯（每周中等强度运动时长）。

4.环境暴露：了解近期旅行史（特别是卫生条件较差地区）、宠物接触史（如犬猫饲养）、家庭成员肠道健康状况（如是否存在腹泻/便秘聚集现象）。

（二）症状评估

采用标准化量表结合症状特征描述进行评估：

-排便异常：记录每日排便次数（正常1-2次/天或1次/2天）、粪便性状（采用布里斯托大便分类法，1-2型为便秘，6-7型为腹泻）、排便费力程度（VAS评分0-10分）、粪便颜色及气味（如恶臭提示蛋白质腐败过度，陶土色提示胆汁排泄异常）。

-腹部症状：腹痛需明确部位（如左下腹多见于IBS，右下腹需排除阑尾炎）、性质（绞痛提示痉挛，钝痛提示炎症）、持续时间（阵发性/持续性）、与排便的关系（排便后缓解多见于IBS）；腹胀需评估严重程度（通过腹围测量或视觉模拟评分）及昼夜变化（餐后加重提示消化吸收不良）。

-全身症状：记录体重变化（近3月体重下降≥5%需警惕器质性疾病）、疲劳感（通过FACIT-F量表评分）、皮肤表现（如湿疹、痤疮与菌群代谢产物相关）及精神状态（如焦虑、抑郁通过PHQ-9/GAD-7量表评估）。

（三）体格检查

重点关注腹部体征（如压痛部位、肠鸣音频率）、营养状况（BMI、皮褶厚度、握力）、肛周情况（如痔疮、肛裂）及全身表现（如舌炎提示B族维生素缺乏，皮肤色素沉着提示肠病性肢端皮炎）。

（四）实验室基础检查

1.常规检查：血常规（贫血提示缺铁或维生素B12吸收不良）、血生化（白蛋白降低提示营养不良，肝酶异常提示肠-肝轴功能紊乱）、炎症指标（CRP、血沉升高提示肠道炎症）。

2.粪便检查：粪便常规+隐血（红细胞提示出血，白细胞提示炎症，隐血阳性需排除肿瘤）、粪便钙卫蛋白（≥200μg/g提示肠道黏膜炎症活动）、粪便乳铁蛋白（与钙卫蛋白联合评估炎症程度）。

二、肠道微生态检测技术规范

检测是明确菌群失调类型、指导精准干预的关键，需规范样本采集、检测方法及结果解读。

（一）样本采集与保存

1.粪便样本：采集新鲜粪便（排便后2小时内），避免尿液/水污染，取中央部分约5g（避免表面黏液或血液），置于无菌密封管（含RNA/DNA保存液，如OMNIgene?GUT）。冷藏（4℃）不超过24小时，-80℃长期保存。

2.黏膜样本：仅在肠镜检查时采集，使用无菌刷取病变/非病变黏膜表面黏液，避免接触肠腔内容物，立即置于保存液中。

（二）检测方法及操作

1.高通量测序：

-DNA提取：采用机械破碎（珠磨法）联合化学裂解，去除宿主DNA（如使用宿主DNA去除试剂盒），确保细菌DNA纯度（OD260/280=1.8-2.0）。

-扩增与测序：选择16SrRNA基因V3-V4高变区（引物341F/806R），扩增产物通过IlluminaMiSeq平台测序（PE250，测序深度≥10^5reads/样本）。

-生物信息分析：使用QIIME2或DADA2进行序列质控（过滤低质量、嵌合体序列），