DB34-T 3304-2018 中草药中16种多环芳烃的测定 气相色谱质谱法.docxVIP

DB34/T中草药中16种多环芳烃的测定气相色谱质谱法

1范围

本标准规定了中草药中16种多环芳烃残留量的气相色谱质谱测定方法。

本标准适用于中药材、中药饮片及中草药制剂中萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、?、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝、茚并[1,2,3cd]芘等16种多环芳烃残留量的测定。

2原理

试样经正己烷丙酮混合溶液超声提取，提取液经固相萃取柱净化，浓缩后用气相色谱质谱联用仪测定，外标法定量。

3试剂与材料

3.1试剂

3.1.1正己烷：色谱纯。

3.1.2丙酮：色谱纯。

3.1.3二氯甲烷：色谱纯。

3.1.4乙腈：色谱纯。

3.1.5无水硫酸钠：分析纯，使用前在650℃灼烧4h，冷却后置于干燥器中备用。

3.2标准品

3.2.116种多环芳烃标准品：萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、?、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝、茚并[1,2,3cd]芘，纯度均≥98%。

3.2.2标准储备溶液：分别准确称取适量各多环芳烃标准品，用乙腈溶解并定容，配制成浓度为100μg/mL的单标储备溶液，于18℃避光保存。

3.2.3混合标准中间溶液：准确吸取适量各单标储备溶液，用乙腈稀释配制成浓度为10μg/mL的混合标准中间溶液，于18℃避光保存。

3.3材料

3.3.1固相萃取柱：硅胶固相萃取柱，规格为500mg/6mL，或相当者。

3.3.2滤膜：0.22μm有机相滤膜。

3.3.3微量注射器：10μL、50μL、100μL、1000μL。

3.3.4容量瓶：10mL、25mL、50mL、100mL。

3.3.5具塞刻度试管：10mL、25mL。

3.3.6超声清洗仪：频率40kHz，功率300W。

3.3.7氮吹仪。

3.3.8涡旋混合器。

4仪器与设备

4.1气相色谱质谱联用仪：配备电子轰击离子源（EI）。

4.2色谱柱：DB5MS石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）或相当者。

4.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。

4.4离心机：转速不低于4000r/min。

4.5旋转蒸发仪。

4.6超声波清洗器：功率300W，频率40kHz。

4.7氮吹浓缩仪。

4.8固相萃取装置。

4.9有机相滤膜：0.22μm。

4.10具塞离心管：50mL、100mL。

4.11容量瓶：10mL、25mL、50mL、100mL。

4.12移液器：100μL、1000μL、5000μL。

5试样制备与保存

5.1试样制备

取中草药样品，粉碎后过60目筛，混匀备用。

5.2试样保存

6分析步骤

6.1提取

称取试样2.0g（精确至0.01g），置于50mL具塞离心管中，加入20mL正己烷丙酮（1:1，v/v）混合溶液，涡旋混匀1min，超声提取30min，以4000r/min离心5min，将上清液转移至100mL圆底烧瓶中。残渣重复提取一次，合并提取液。

6.2净化

6.2.1固相萃取柱活化：依次用5mL二氯甲烷、5mL正己烷活化固相萃取柱，保持柱体湿润。

6.2.2上样：将提取液浓缩至近干，用5mL正己烷溶解残渣，转移至已活化的固相萃取柱中，控制流速1mL/min。

6.2.3淋洗：用5mL正己烷淋洗，弃去淋洗液。

6.2.4洗脱：用10mL二氯甲烷正己烷（1:1，v/v）混合溶液洗脱，收集洗脱液。

6.2.5浓缩：将洗脱液在40℃水浴中旋转蒸发至近干，用1mL乙腈溶解残渣，过0.22μm有机相滤膜，供气相色谱质谱测定。

6.3.1气相色谱条件

色谱柱：DB5MS石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；

进样口温度：280℃；

进样方式：不分流进样；

进样量：1μL；

载气：氦气，纯度≥99.999%；

流速：1.0mL/min；

柱温程序：初始温度60℃，保持1min，以20℃/min升至200℃，再以5℃/min升至280℃，保持10min。

6.3.2质谱条件

离子源：电子轰击离子源（EI）；

离子源温度：230℃；

四极杆温度：150℃；

传输线温度：280℃；

电离能量：70eV；

溶剂延迟时间：5min；

扫描方式：选择离子监测（SIM）模式；

16种多环芳烃的监测离子见表1。

表116种多环芳烃的监测离子

|序号|化合物名称|定量离子(m/z)|定性离子(m/z)|

|||||

|1|萘|128|127,129|

|2|苊烯|152