鸽腺病毒Ⅰ型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及遗传进化分析.pdfVIP

江西农业大学学报2025，47（1）http://xuebao.jxau.

ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis/10.3724/aauj.2025016

安乐乐，刘倩芸，蓝秋菊，等.鸽腺病毒Ⅰ型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及遗传进化分析［J］.江西农业

大学学报，2025，47（1）：167-177.

ANLL,LIUQY,LANQJ,etal.EstablishmentofaTaqManprobereal-timequantitativePCRassayfordetectionofpigeonadeno‑

virustypeⅠandanalysisofitsgeneticevolution[J].ActaagriculturaeuniversitatisJiangxiensis,2025,47(1):167-177.

鸽腺病毒Ⅰ型TaqMan探针实时荧光定量

PCR检测方法的建立及遗传进化分析

1，21，21，221，2*

安乐乐，刘倩芸，蓝秋菊，罗迅，赵永清

（1.西北民族大学生物医学研究中心，甘肃兰州730030；2.西北民族大学生命科学与工程学院，甘肃兰州730100）

摘要：【目的】鸽腺病毒感染在全球鸽群中广泛分布，可引起多种临床症状，如呕吐、腹泻、肝脏损伤等，严重影响

鸽的健康与养殖效益。建立一种快速高效检测鸽腺病毒Ⅰ型（PiAdV-Ⅰ）TaqMan探针实时荧光定量PCR方法，

为鸽腺病毒Ⅰ型临床检测及流行病学调查提供技术平台。【方法】依据GenBank公布鸽腺病毒Ⅰ型Hexon基因保

守区设计引物探针并构建重组质粒pCE2-TA-PiAdV-Ⅰ；优化反应体系和程序，绘制标准曲线、特异性、敏感性

和重复性评价，建立鸽腺病毒Ⅰ型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法；扩增测序阳性临床样品的Hexon

基因，使用MEGA5.0进行进化树构建及同源性分析。【结果】该TaqMan探针实时荧光定量PCR方法标准曲线

2

y=-3.1081x+37.374，线性相关系数R为0.9977，线性关系良好；与鸽疱疹病毒、鸽圆环病毒等鸽子其他常见病

毒无交叉反应，具有良好的特异性；最低检测拷贝数为14.6copies/μL，敏感性是常规PCR方法的10倍，具有高

敏感性；组内和组间变异系数均低于1.1%，重复性好。通过检测112份鸽子病料样品，该TaqMan探针实时荧光

定量PCR方法检测阳性率为69.64%（78/112），并且高于常规PCR方法阳性检出率65.18%（73/112）。此外，建立

的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法与常规PCR方法的阳性符合率为100%，总体符合率为95.54%。3条测

序毒株与Ⅰ型鸽腺病毒参考毒株同源性为99.47%~99.71%，遗传关系高度接近，表明可能由同一个原始毒株进

化而来。【结论】研究建立的鸽腺病毒Ⅰ型TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法线性关系良好、特异性强、敏

感性高及重复性好，可快速高效检测出临床样品中的PiAdV-Ⅰ。此外，所扩增序列能够用于分析临床毒株遗

传进化特征，有助于快速准确诊断鸽腺病毒感染及疫苗研发提供参考依据。

关键词：鸽腺病毒Ⅰ型；Hexon基因；TaqMan探针实时荧光定量PCR；遗传进化分析；临床检测；

流行病学调查

中图分类号：S855.3文献标志码：A开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

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