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第三章细胞工程制药

教学目的

掌握细胞融合方法；

掌握杂交瘤技术；

了解生物转化法及应用。

教学重点：细胞融合、杂交瘤技术

教学难点：杂交瘤技术基本原理

计划学时：4

第一节概述

细胞工程的主要技术及其应用

细胞与组织培养技术作物改良、花卉林木繁殖、产前诊断、遗传病防止

细胞大批培养技术名贵药物、他生物药品

细细胞融合技术创造新植物、生产单克隆抗体、培育高产新菌种

胞染色体工程技术创造作物新类型

工

程

细胞器移植技术创造动植物新品种

体外受精和胚胎移植技术动植物改良、人类优生

DNA重组技术动植物改良、基因治疗

外源基因导入技术

物理化学技术

第二节细胞融合

一细胞融合技术的发展

1细胞融合定义

细胞融合|是指人为地使两种不同的生物细胞在同一培养器中，用无性的人工方法进行直接接触，

产生能同时表达两个亲本细胞有益性状的细胞杂交技术。

2细胞融合技术发展简史

(1)动物细胞

1838年Miller最早描述了脊椎动物肿瘤细胞可融合成多核细胞的现象

1875年Lange观察到蛙的血细胞中也存在多核细胞的现象

1907年Harrison体外组织培养技术建立及以后的发展，发现了体外培养的细胞也能融合成多核巨细

胞，为细胞融合的研究工作创造了实验条件

50年代初发现麻疹病毒和腮腺炎病毒能引起细胞融合

1954年Stahelin用连续照相的方法追踪了炭疽杆菌的原生质体融合

1958年冈田善雄用高浓度仙台病毒在体外使小鼠艾氏腹水瘤细胞得以融合，他的这一发现打破了细

胞融合只能在同种生物间进行的枷锁，为生物的远缘杂交育种奠定了基础

1965年Harris用仙台病毒在体外使培养的Hela细胞与小鼠艾氏腹水瘤细胞融合成杂种细胞

1975年Milstein和kolor两人首先将骨髓细胞和脾细胞进行融合，获得了产生抗体的杂交瘤细胞，这

种杂交瘤细胞继承了来自两个亲本细胞的特性，既能分泌抗体又能像肿瘤细胞那样快速无限的生长繁

殖，因而创建了杂交瘤技术。

(2)植物细胞

1970年Cocking找到了合适的酶破坏植物细胞，使其形成原生质体

1972年卡尔逊用硝酸钠作融合促进剂，把不同烟草原生质体进行融合，获得体细胞杂种

1978年，德国科学家首次把马铃薯和番茄原生质体进行融合，获得体细胞杂种

3（）微生物细胞

1953年Weibull等首先用溶菌酶溶解细菌细胞壁获得原生质体

1958年Brenner等提出细菌原生质体标准

ddy等用蜗牛酶并配合其他条件，分别从酵母菌及丝状真菌中制备出原生质体

Dougals首先用溶菌酶从链霉菌菌丝中制备出原生质体，并用噬菌体吸附及血清学试验证明细胞

壁确实已经被溶解；

冈西等对链霉菌原生质体形成和再生条件进行了系统研究

Landman等对枯草芽泡杆菌原生质体形成和再生进行广泛研究

1974年聚乙二醇（PG）诱导融合方法建立，目前PG基本代替了仙台病毒作为细胞融合促融

剂。

二细胞工程中遗传物质转移途径

一（）遗传物质转移技术是指转移核或含有DNA细胞器技术。

1遗传物质转移方式

（1）完整细胞之间