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病理科细胞学检查技术规范
演讲人：
日期:
目录
CATALOGUE
02
制片技术规范
03
染色操作规范
04
镜检诊断流程
05
报告签发管理
06
质量控制体系
01
标本接收与预处理
01
标本接收与预处理
PART
需核对标本标签与申请单信息的一致性，包括姓名、性别、唯一标识号等关键字段，确保无遗漏或错误。
检查送检标本是否符合检测要求（如痰液、胸腹水、细针穿刺物等），并核实容器数量与申请单标注是否匹配。
观察标本是否存在凝固、溶血、污染或量不足等问题，对不合格标本需记录并反馈临床科室。
核查标本是否在规定的温度、时间范围内送达，避免因运输不当导致细胞降解或失效。
标本接收核对标准
患者信息完整性验证
标本类型与数量确认
标本质量初步评估
运输条件合规性检查
标本登记与信息录入
双人核对录入机制
采用双人独立录入系统，确保患者信息、标本类型、送检科室等数据准确无误，降低人为错误风险。
01
电子化管理系统应用
通过条码或RFID技术实现标本全流程追踪，记录接收时间、处理人员及交接环节，保障可追溯性。
02
异常情况标注规范
对特殊标本（如急诊、加急）或异常状态（如泄漏、破损）需在系统中单独标注并触发预警流程。
03
标本保存条件控制
根据不同标本类型设定保存温度（如4℃冷藏用于体液标本，-20℃冷冻用于特殊研究样本），定期校准设备并记录温度波动。
温度分层管理
明确各类标本的最长保存时限（如浆膜腔积液需在2小时内处理），超时标本需评估细胞活性并备注说明。
每日监测保存区域的温湿度、消毒频率及生物安全指标，留存记录以备质量审查。
时间敏感性控制
针对非立即检测的标本，按规范添加乙醇、甲醛等固定剂，避免细胞自溶或结构破坏。
防腐剂与固定剂选择
01
02
04
03
环境监测与记录
02
制片技术规范
PART
离心涂片制备方法
样本处理与离心参数
样本需经生理盐水或专用保存液稀释后，以特定转速离心，确保细胞沉淀均匀且无破坏。离心后弃上清，保留底部细胞团用于涂片。
染色与封片要求
采用巴氏染色或HE染色，染色时间需精确控制以突出核质对比。封片时使用中性树胶，避免气泡产生并确保长期保存稳定性。
涂片厚度控制
使用玻片倾斜法或推片技术制备涂片，需保证单层细胞分布，避免过厚导致重叠或过薄影响诊断。涂片后立即固定以防细胞干燥变形。
液基细胞学制片流程
样本前处理
样本需通过滤膜或密度梯度离心去除黏液、血液等干扰物，保留目标细胞。处理液选择需匹配样本类型（如妇科、非妇科）。
自动化制片技术
每批次需监控细胞覆盖率、背景清洁度及染色效果，定期校准设备并记录参数，确保制片一致性。
使用液基细胞学设备（如ThinPrep或SurePath）自动转移细胞至玻片，形成均匀单层细胞层，显著提高异常细胞检出率。
质量控制要点
细胞块制作标准
细胞团固定与包埋
离心后细胞团需经福尔马林固定，脱水后嵌入石蜡。包埋时调整细胞团方向，确保切片时最大截面暴露。
切片厚度与染色
切片厚度控制在4-5微米，避免过厚影响镜下观察。常规HE染色外，可加做免疫组化标记以辅助诊断。
适用性与局限性
细胞块适用于分子检测（如基因突变分析），但需评估细胞量是否充足。低细胞量样本可能导致检测失败，需提前评估可行性。
03
染色操作规范
PART
固定样本处理
苏木精染色
样本需用95%乙醇固定15-30分钟，确保细胞结构完整，防止染色过程中细胞溶解或变形。
将固定后的样本浸入苏木精染液5-10分钟，核染色质清晰可见后，用流水冲洗去除多余染料。
巴氏染色操作步骤
分色与蓝化
使用0.5%盐酸乙醇分色数秒，去除胞质残留染料，再以稀氨水或Scott液蓝化1分钟，增强核染色对比度。
胞质染色与透明化
依次浸入EA36或OG6染液2-3分钟，梯度乙醇脱水，二甲苯透明后封片，确保细胞形态和染色稳定性。
快速染色技术要点
试剂预配与质量控制
需使用即用型染液（如Diff-Quik），定期监测染液pH值和沉淀物，避免染色不均或背景污染。
标准化操作流程
样本均匀涂片后，依次浸入固定液（甲醇）、伊红染液（1号液）和亚甲蓝染液（2号液），每步骤30秒，流水冲洗后快速干燥封片。
适应性与局限性
适用于术中快速病理诊断，但对核细节显示较差，需结合临床需求选择染色方案。
特殊染色应用规范
黏液染色（AB-PAS）
用于鉴别腺癌或黏液性肿瘤，阿尔新蓝（pH2.5）染色酸性黏液，PAS反应显示中性黏液，需严格区分染色区域并对照阳性对照。
铁染色（普鲁士蓝）
检测组织内含铁血黄素，样本经盐酸亚铁氰化钾处理20分钟，镜下观察蓝色颗粒，需避免铁污染假阳性。
网状纤维染色（Gomori）
用于肝硬化或纤维化评估，氨银溶液浸染后还原显色，需控制反应时间防止过度染色或背景沉淀。
04
镜检诊断流程
PART
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