基因突变与疾病.pptVIP

Gitschier等人调查了92例血友病A病人和80例正常人的Ⅷ因子基因，在外显子上2个无义点突变和内含子上1个点突变。2个无义点突变均发生在TaqI酶切位点上，1个位于第24个外显子，另1个位于第26个外显子，由TCGA转换成了TTGA，产生了框内终止密码子TGA而使得翻译提前终止，结果产生没有活性的Ⅷ因子蛋白。在第26外显子发生无义突变时，产生的蛋白质仅比正常FⅧ少26个氨基酸，但却没有活性。内含子中的点突变亦能影响Ⅷ因子的表达。在第2个内含子中由于TaqI位点丢失(亦为TCGA→TTGA转换)；导致mRNA的剪切异常在基因FⅧ的同一密码子上可发生不同方向的点突变而产生轻重不同的血友病。第2307位氨基酸精氨酸的密码子由于C→T转换变成终止密码使翻译提前终止，结果导致严重的血友病，病人血液中检测不到有活性的FⅧ。而当C→T转换发生在另一条链的相应位置上时，即出现G→A转换，使精氨酸变成谷氨酰胺。该血友病患者病情较轻。Youssonfian等报告了2个的由于CG→TG转换而发生的无义突变，1个位于第18外显子第1960位氨基酸密码子，另1个位于第22外显子第2135位密码子。综合其他研究者的报道，该CG位点是一个突变热点。这主要由于甲基化的胞嘧啶容易发生脱氨基作用变成胸腺嘧啶而导致C→T转换。如果C→T转换发生于TaqI酶切位点TCGA上，即可产生TGA终止密码子而使翻译提前终止，在因子Ⅷ编码区共有CG二核苷酸71个，其中12个发生转换突变时能形成新的终止密码。这是血友病A点突变最常见的类型。倒位突变近年来随着基因点突变检测技术的出现和完善，已找出绝大数轻、中型HA的遗传缺陷，但仍有约1/2重型HA的分子机制不明。Lakich等于1992年证实这近半数重型HA是由于FⅧ基因内含子22倒位这一共同分子缺陷引起的。内含子22倒位与FⅧ相关基因A(F8A)有关。在FVIII基因内含子22中有两个基因F8A和F8B。这是哺乳动物首次发现的基因内基因。这两个基因间有一具有双向转录活性的CpG岛。F8A转录方向与FVIII相反，F8B与FVIII相同。X染色体远端距F8A约500kb处另有两个F8A同源基因。F8A可与两个同源基因之一发生同源重组，使FVIII基因从外显子1～22倒位至X染色体长臂远端，而外显子23～26仍处于原位。分裂的两部分不能被剪切到一起，导致重型血友病甲其他突变缺失突变任何部位均可缺失，长度从2bp到210kb以上，对一组200例血友病A患者的分析研究表明，其中有150例存在各种类型的基因缺陷。插入突变有报道FVIII外显子14处插入了L1重复序列，以及其他3.8kb序列。基因重排基因重排引起血友病A较少见，有报道1例因子Ⅷ外显子重排成1-4,9-7,14-16……，不能正常合成FⅧ。血友病B（HemophiliaB，XR）血友病B由于凝血因子Ⅸ缺乏或其凝血功能降低所致，凝血因子IX(简称FIX)是一种Mr为56kD的糖蛋白,主要由肝细胞产生，并在肝内经过一系列酶学修饰，成为成熟的FIX后，再分泌到血液中，参与血液凝固过程中的生化反应。在肝细胞内，FIX基因表达的最初产物可称之为FIX前体，它由461个氨基酸残基组成，按其功能不同可将其分为信号肽(从-46至-18共29个残基、前导肽(从-17至-1，共17个残基)和成熟蛋白(从+1至+415，共415个残基)三个部分。Gla区域。它含有46个氨基酸残基(1-46)。当Ca2+与Gla残基结合时，Gla区构象改变，使其分子中能与磷酯结合的部位暴露于分子表面。EGF区域。由81个氨基酸残基(47-127)组成，可分别称之为第一EGF区域(47-84)和第二EGF区域(85-127)，其功能尚不清楚。活化区域。从第128位到195位残基。FIX在活化过程中，切除游离出这部分肽段。(1-180)145个氨基侧链可称之为轻链。(181-415)235个氨基酸残基称为重链。轻链与重链之间借助二硫键而相互连接。活化FIX(IXa)的重链。这是指从第181位至第415位氨基酸残基这一段顺序。IXa的活性中心就是由这一段顺序所构成的，因而它实际上是FIXa中的一个催化亚基。FIXa的催化作用主要由位于第221位上的组氨酸和第269位上的天冬氨酸残基决定。除第359位上的天冬氨酸残基外，第384位上的丝氨酸残基、第386位上及第395位上的甘氨酸残基也能提供与底物的结合位点。凝血因子IX基因结构基因FIX在X染色体上的座位确定为Xq26.3-q27.1。这个座位与HPRT、H