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判断种子的优劣可以从以下几方面进行:细胞或菌体菌体形态:可通过显微镜下观察,要求是菌体健壮、菌形一致均匀整齐,有的还有一定的排列。菌体浓度:离心沉淀法、光密度法、细胞计数法培养液的外观:颜色、粘度等第30页,共47页,星期日,2025年,2月5日判断种子的优劣可以从以下几方面进行:生化指标(1)种子液的糖、氮、磷含量的变化和PH变化菌体生长繁殖、物质代谢的反映(2)种子液产物的生成量种子生产能力和成熟程度的表现(3)测种子液中某种酶的活力如土霉素生产种子液中的淀粉酶活力与土霉素发酵单位有一定的关系第31页,共47页,星期日,2025年,2月5日种子的质量主要受孢子质量、培养基、培养条件、种龄和接种量等因素的影响。以下分别从影响孢子质量和影响种子质量两个方面说明种子质量的主要因素及控制措施。二、影响种子质量的因素第32页,共47页,星期日,2025年,2月5日(一)影响孢子质量的因素培养基培养温度和湿度培养时间和冷藏时间接种量第33页,共47页,星期日,2025年,2月5日1、培养基生产过程中经常出现孢子质量不稳定的现象,其主要原因是原材料质量波动。例如在四环素、土霉素生产中,配制产孢子斜面培养基用的麸皮,因小麦产地、品种、加工方法及用量的不同对孢子质量的影响也不同。蛋白胨加工原料不同如鱼胨或骨胨对孢子影响也不同。原材料质量的波动,起它要作用的是其中无机离子含量不同,如微量元素Mg2+、Cu2+、Ba2+能刺激孢子的形成。磷含量太多或太少也会影响孢子的质量。第34页,共47页,星期日,2025年,2月5日第五章种子扩大培养第1页,共47页,星期日,2025年,2月5日第2页,共47页,星期日,2025年,2月5日15L种子发酵罐第3页,共47页,星期日,2025年,2月5日300L啤酒发酵罐第4页,共47页,星期日,2025年,2月5日第一节种子制备工艺实验室准备阶段生产车间阶段放罐,后处理产品第5页,共47页,星期日,2025年,2月5日种子扩大培养概念:种子扩大培养:是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。第6页,共47页,星期日,2025年,2月5日种子扩大培养的原因工业生产规模的增大需要种子就增多种子的扩大培养种子扩大培养的任务,不但要得到纯而壮的培养物,还要获得活力旺盛的、性能稳定、接种数量足够的、纯的培养物。菌种的活化与种子的扩大培养的区别?第7页,共47页,星期日,2025年,2月5日菌种扩大培养小结(1)为发酵罐的投料提供足够数量的代谢旺盛的种子。(2)发酵时间的长短与接种量的大小有关,接种量大,发酵时间则短。(3)将较多数量的成熟菌体接入发酵罐中,就有利于缩短发酵时间,提高发酵罐的利用率,并且也有利于减少染菌的机会。(4)对于不同产品的发酵过程来说,必须根据菌种生长繁殖速度快慢及生产的规模决定种子扩大培养的级数。第8页,共47页,星期日,2025年,2月5日种子质量的优劣对发酵生产起关键作用。其生产方法与条件随不同的生产品种和菌种种类而异。种子液(几或几十立方米)按10%接种量发酵罐(几十或几百立方米)由实验室制备到车间生产的过程第9页,共47页,星期日,2025年,2月5日作为种子的要求:1)、菌种活力强,移种后能迅速生长,迟缓期短2)、生理性状稳定3)、菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求4)、无杂菌污染5)、保持稳定的生产能力第10页,共47页,星期日,2025年,2月5日菌种的培养方法:固体培养法液体培养法(两类)第11页,共47页,星期日,2025年,2月5日种子制备的过程大致可分为:实验室种子制备阶段生产车间种子制备阶段第12页,共47页,星期日,2025年,2月5日一、实验室种子制备保藏在沙土管、冷冻干燥管或斜面上的菌种经无菌操作接入适合于孢子发芽或者营养体生长的斜面培养基上,经培养成熟后挑选正常的孢子或营养菌体再一次接入试管斜面反复培养几代。这一阶段也称为活化,目的是使保藏的菌种达到正常稳定的生长代谢速度。斜面活化的菌种进一步扩大培养,根据菌种特性的不同可采用不同
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