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酶工程试题

一、选择题（每题3分，共30分）

下列不属于酶固定化方法的是（）

A.吸附法B.包埋法C.交联法D.透析法

在酶的发酵生产中，下列哪种碳源最适合作为产酶培养基的碳源（）

A.葡萄糖B.淀粉C.蔗糖D.麦芽糖

酶分子改造中，通过改变酶分子的氨基酸序列来提高酶活性的技术是（）

A.定点突变技术B.随机突变技术C.基因重组技术D.蛋白质工程技术

下列哪种酶的最适pH值在酸性范围（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.碱性磷酸酶D.过氧化氢酶

酶的抑制剂中，哪种抑制剂与酶的活性中心以外的基团结合（）

A.竞争性抑制剂B.非竞争性抑制剂C.反竞争性抑制剂D.不可逆抑制剂

在酶的提取过程中，为了防止酶的变性失活，通常采用的温度条件是（）

A.高温B.室温C.低温D.任意温度

下列哪种方法不能用于酶的纯度检测（）

A.聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）B.高效液相色谱（HPLC）C.盐析法D.凝胶过滤层析

固定化酶的优点不包括（）

A.可重复使用B.易与产物分离C.提高酶的稳定性D.提高酶的催化效率

酶的比活力是指（）

A.单位时间内催化底物转化的量B.单位质量酶蛋白所具有的酶活力C.酶催化反应的速率D.酶的浓度

在酶的固定化过程中，下列哪种载体材料具有良好的生物相容性（）

A.活性炭B.离子交换树脂C.海藻酸钠D.硅胶

二、填空题（每空2分，共20分）

酶工程主要包括酶的生产、（）、酶的固定化和酶的应用等方面。

酶的发酵生产中，常用的微生物菌种有细菌、（）和酵母菌等。

酶的催化作用具有高效性、专一性、（）和反应条件温和等特点。

固定化酶的载体材料可分为有机载体、无机载体和（）三大类。

酶分子的化学修饰中，常用的修饰剂有（）、酰化剂和烷基化剂等。

酶的活力单位是指在一定条件下，酶催化一定化学反应的（）。

发酵过程中，影响酶产量的主要因素有培养基组成、温度、pH值、（）和溶解氧等。

酶的提取方法主要有盐溶法、（）、有机溶剂提取法和超声波提取法等。

蛋白质工程的核心是（），通过对基因进行改造来获得具有特定结构和功能的蛋白质。

酶在食品工业中的应用主要有淀粉加工、（）和肉类嫩化等。

三、简答题（每题10分，共30分）

简述固定化酶的制备流程及各步骤的关键要点。

说明酶发酵过程中如何控制溶解氧浓度，及其对酶产量的影响。

简述酶分子改造的主要方法，并举例说明其在实际生产中的应用。

四、案例分析题（每题20分，共20分）

某生物制药公司计划利用微生物发酵生产一种用于洗涤剂工业的碱性蛋白酶。请结合酶工程相关知识，分析以下问题：

该公司在筛选产碱性蛋白酶的微生物菌种时，应考虑哪些关键指标？

设计该碱性蛋白酶发酵培养基的主要成分，并说明各成分的作用。

在发酵过程中，如何监控和调控发酵参数以提高碱性蛋白酶的产量和质量？

发酵结束后，如何对发酵液中的碱性蛋白酶进行提取和纯化，请设计合理的工艺路线。

酶工程试题答案

一、选择题（每题3分，共30分）

D解析：透析法主要用于分离纯化蛋白质或去除小分子杂质，不属于酶固定化方法，其他A、B、C选项均为常见的酶固定化方法。

B解析：淀粉属于迟效碳源，在酶的发酵生产中，迟效碳源能避免菌体过早进入对数生长期而大量消耗营养，有利于酶的合成，而葡萄糖等速效碳源易导致菌体过度生长，抑制酶的产生。

A解析：定点突变技术可精确改变酶分子特定的氨基酸序列，从而有针对性地提高酶活性；随机突变技术突变位点不确定；基因重组技术主要用于基因的转移和表达；蛋白质工程技术是一个更广泛的概念，定点突变是其常用技术之一。

B解析：胃蛋白酶的最适pH值在1.5-2.5之间，属于酸性范围；胰蛋白酶最适pH为7.5-8.5，碱性磷酸酶最适pH为8.0-10.0，过氧化氢酶最适pH约为7.0，均不在酸性范围。

B解析：非竞争性抑制剂与酶活性中心以外的基团结合，不影响底物与酶的结合，但形成的酶-底物-抑制剂复合物不能发生反应；竞争性抑制剂与底物竞争酶的活性中心；反竞争性抑制剂仅与酶-底物复合物结合；不可逆抑制剂通常与酶的活性中心基团共价结合。

C解析：低温条件能降低酶的变性速率，减少酶的失活，因此在酶的提取过程中常采用低温操作；高温会导致酶变性失活，室温下酶也有一定的变性速率。

C解析：盐析法主要用于酶的分离和沉淀，不能用于检测酶的纯度；PAGE、HPLC和凝胶过滤层析均