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第1页,共23页,星期日,2025年,2月5日色谱的来源和发展1色谱法的分类2色谱法的基本原理3第2页,共23页,星期日,2025年,2月5日色谱法的来源和发展色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。1903年,俄国植物学家MikhailTswett最先发明。他采用填充有固体CaCO3细粒子的玻璃柱,将植物色素的混合物加于柱顶端,然后以溶剂淋洗,被分离的组份在柱中显示了不同的色带,他称之为色谱。第3页,共23页,星期日,2025年,2月5日(1)粗叶绿素+石油醚(2)石油醚流动相相对运动固定相(吸附剂)CaCO3胡萝卜素利用不同物质叶黄素在流动相与固定相叶绿素作用时的行为差异得到分离(吸附)(3)小刀割开,用醇溶出?第4页,共23页,星期日,2025年,2月5日1944年纸色谱20世纪50年代薄层色谱1952年气相色谱20世纪60年代末高效液相色谱1975年离子色谱20世纪70年代末~80年代初毛细管电泳第5页,共23页,星期日,2025年,2月5日Agilent6280第6页,共23页,星期日,2025年,2月5日Tiselius,A.W.K.Martin,A.J.P.Synge,R.L.M.1948年Nobel化学奖1952年Nobel化学奖吸附色谱与电泳分配色谱第7页,共23页,星期日,2025年,2月5日色谱法的分类色谱分析法有很多种类,从不同的角度出发可以有不同的分类方法。从两相的状态分类:色谱法中,流动相可以是气体,也可以是液体,由此可分为气相色谱法(GC)、液相色谱法(LC)和超临界体色谱(SFC)。固定相既可以是固体,也可以是涂在固体上的液体,由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。按固定相的形式分类:柱色谱:固定相装在色谱柱中;纸色谱:利用滤纸作载体,吸附在纸上的水作固定相;薄层色谱:将固体吸附剂在玻璃板或塑料板上制成薄层作固定相。第8页,共23页,星期日,2025年,2月5日第9页,共23页,星期日,2025年,2月5日3.按分离原理分类:吸附色谱法:利用吸附剂(固定相一般是固体)表面对不同组分吸附能力的差别进行分离的方法。分配色谱法:利用不同组分在两相间的分配系数的差别进行分离的方法。离子交换色谱:利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方法。空间排阻色谱法:利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。第10页,共23页,星期日,2025年,2月5日第11页,共23页,星期日,2025年,2月5日色谱法的基本原理利用物质在流动相与固定相两相中的分配(吸附)系数差异而被分离,样品中的组分在两相中多次分配(吸附),分配(吸附)系数小的迁移速度快,先流出柱,分配(吸附)系数大的迁移速度慢,后流出柱,从而达到分离。用来描述分离过程样品分子在两相间的分配(吸附)的参数称为分配系数(吸附平衡常数)。它是指在一定温度和压力下,组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值。第12页,共23页,星期日,2025年,2月5日1.薄层色谱0.25mm厚纤维素,硅胶玻板2.纸色谱滤纸液-液萃取为原理组份在两相中反复分配因毛细作用而上升溶剂溶质在水相中各种存在形式总浓度分配比k=c水/c有溶质在有机相中各种存在形式总浓度平面色谱第13页,共23页,星期日,2025年,2月5日常用吸附剂:硅胶、氧化铝、聚酰胺、纤维素等。常用展开剂:极性弱强石油醚、环己烷、二硫化碳、四氯化碳、苯、甲苯、二氯甲烷、
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