2026版红对勾一轮复习讲与练高考生物模块五　第十单元　第51课时　微生物的培养技术及应用.docxVIP

第51课时微生物的培养技术及应用

1．阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品和无菌区域不被微生物污染的技术。2.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。3.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。4.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。

考点一微生物的基本培养技术

1．培养基的配制

(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。

(2)用途：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。

(3)培养基的种类（按物理性质分）

培养基种类

培养基特点

作用

固体培养基

加凝固剂，如琼脂

微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种

半固体培养基

容器放倒不致流出，剧烈震动则破散

观察微生物的运动、分类鉴定

液体培养基

不加凝固剂

常用于工业生产、微生物的扩大培养

(4)营养组成

①成分

成分

含义

作用

来源

碳源

提供碳元素的物质

构成生物体的细胞的物质和一些代谢物，有些也是异养生物的能源物质

无机碳源：CO2、

NaHCO3等；

有机碳源：糖类、牛肉膏等

氮源

提供氮元素的物质

合成蛋白质、核酸等物质

无机氮源：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；

有机氮源：蛋白胨等

无机盐

为微生物提供除了碳、氮之外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素

为微生物提供无机营养，调节培养基的pH等

无机化合物：

KH2PO4、K2HPO4、NaCl等

水

生物体含量最高的无机化合物

良好的溶剂，参与化学反应等

培养基、代

谢物

②在提供上述几种主要营养物质的基础上，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。

微生物

对培养基的需求

乳酸杆菌

添加维生素

霉菌

一般将培养基调至酸性

细菌

一般将培养基调至中性或弱碱性

厌氧微生物

提供无氧的条件

2.无菌技术

(1)目的：获得纯净的培养物。

(2)关键：防止杂菌污染。

(3)消毒和灭菌

比较项目

条件

结果

常用方法

应用范围

消毒

较为温和的物理、化学或生物等方法

仅杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）

煮沸消毒法

日常用品

巴氏消毒法

不耐高温的液体

化学药物消毒法

操作空间、操作者的衣物和手等

紫外线

消毒法

接种室、接种箱或超净工作台

灭菌

强烈的理化方法

杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子

湿热灭菌法

培养基、容器等

干热灭菌法

玻璃器皿、金属用具等

灼烧灭菌法

接种工具等

3.微生物的纯培养概念辨析

4．纯培养的过程（以酵母菌为例）：包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。

(1)制备培养基

倒平板注意事项：①温度：50℃左右；②操作：在酒精灯火焰附近；③冷凝后平板倒置。

平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快挥发。

(2)接种和分离酵母菌

①平板划线法的原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。

②平板划线法的操作步骤

(3)培养酵母菌

将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24～48h。

(1)不含氮源的平板不能用于微生物培养。（2023·山东卷）(×)

(2)接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃。（2023·山东卷）(×)

(3)培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基。（2022·海南卷）(√)

(4)用作培养基的草本植物给食用菌提供碳源和氮源。（2021·北京卷）(√)

(5)将培养基倒入培养皿后，应立即将培养皿倒过来放置。(×)

(6)配制培养基时应先灭菌再调pH。(×)

(7)（选择性必修3P10“旁栏思考”）无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还具有能有效避免操作者自身被微生物感染的作用。

(8)（选择性必修3P10正文）所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源吗？

提示：自养微生物能利用无机碳源（比如空气中的CO2），培养基中不用添加碳源；固氮微生物可利用N2作为氮源，培养基中不用加入氮源。

【情境应用】甲、乙两位同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。

Ⅰ.甲同学为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基进行培养：

蛋白胨

10g

乳糖

5g

蔗糖

5g

K2HPO4

2g

蒸馏水

1000mL

将pH调到7.2

【问题探究】

(1)该培养基所含有的碳源有蔗糖、乳糖、蛋白胨，其功能是主要用于提供能量以及构成微生物的细胞物质和代谢物。

(2)该培养基所含有的氮源有蛋白胨，其功能是主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢物。

(3)用该培养基培养微生物时，还需