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宠物饲料及其原料中霉菌毒素检测方法的构建与实践

一、引言

1.1研究背景与意义

随着人们生活水平的提高，宠物在人们生活中扮演着越来越重要的角色，成为许多家庭不可或缺的伴侣。据相关数据显示，2023年中国城镇宠物犬猫数量达到12155万只，养犬猫人数为7510万人。宠物数量的增加直接带动了宠物饲料行业的快速发展，2023年中国宠物饲料行业市场规模约为1562亿元，2019-2023年复合增长率达17.28%，产量达到146.3万吨。目前我国宠物饲料产业集中度较高，90%以上的产量集中在华北和华东地区，其中河北省产量占比最高，达到36.12%，山东省紧随其后，占比30.69%。

宠物饲料的质量与安全直接关系到宠物的健康和生命。然而，霉菌毒素污染是宠物饲料行业面临的一个重要问题。霉菌毒素是霉菌在生长繁殖过程中产生的有毒次级代谢产物，目前已知的霉菌毒素约有300-400种，常见且危害较大的有黄曲霉毒素（AF）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON，又称呕吐毒素）、伏马毒素（FB）、赭曲霉毒素A（OTA）和玉米赤霉烯酮（ZEA）等。这些霉菌毒素广泛存在于饲料原料如玉米、小麦、大米等谷物以及动物蛋白原料中。

霉菌毒素对宠物健康有着极大的危害。以黄曲霉毒素B1为例，它是毒性最强的黄曲霉毒素，当犬摄入被其污染的饲粮后，霉菌毒素被十二指肠吸收，进入血液与血浆白蛋白结合，运输至肝脏，在肝脏中转化为有毒的环氧化物，与DNA、RNA和蛋白酶发生反应，可导致肝功能异常、肝脏肿大，甚至引发肝癌。脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）则会导致宠物体增重减少、神经内分泌变化以及干扰蛋白质合成影响免疫系统，低剂量DON可诱发炎症反应，高剂量则诱发免疫抑制，长期暴露具有免疫抑制作用。赭曲霉毒素A主要靶器官是肾脏，与血清中蛋白质紧密结合并在肾脏积累，扰乱肾小管细胞中蛋白质合成等生物过程，引起肾小管间质纤维化，产生肾毒性，犬对其较为敏感，中毒症状包括厌食、体重减轻、呕吐、血性腹泻和脱水等。玉米赤霉烯酮是一种非甾体雌激素毒素，结构与雌激素类似，雌性宠物暴露后，输卵管和子宫会出现增生和积水，雄性宠物暴露会导致精子生成减少，约1mg/kg剂量的ZEA就可能导致宠物不孕，影响排卵、受孕、着床、胎儿生长和新生儿的生存能力。伏马毒素主要毒性靶器官为肺脏和肝脏，长期食用被其污染的饲料会导致宠物食欲减弱、肺水肿、呼吸黏膜发绀，严重时导致呼吸衰竭死亡。

霉菌毒素不仅危害宠物健康，也给宠物饲料行业带来巨大的经济损失。一方面，受霉菌毒素污染的饲料营养价值降低，甚至完全失去饲用价值，造成饲料资源的浪费；另一方面，宠物因食用受污染饲料患病或死亡，会降低消费者对宠物饲料品牌的信任度，影响企业的市场形象和销售业绩。例如，若某品牌宠物饲料被检测出霉菌毒素超标，可能引发消费者的恐慌和抵制，导致该品牌产品销量大幅下滑，企业不仅要面临经济损失，还需投入大量资源进行危机公关和产品整改。

建立准确、快速、灵敏的宠物饲料及其原料中霉菌毒素检测方法具有重要的现实意义。准确的检测方法能够及时发现饲料中的霉菌毒素污染问题，为宠物饲料生产企业提供质量控制依据，帮助企业采取有效的预防和处理措施，避免不合格产品流入市场。灵敏的检测技术可以检测出低含量的霉菌毒素，提前预警潜在的安全风险，保障宠物的健康。快速的检测方法能够提高检测效率，降低检测成本，满足宠物饲料行业大规模生产和质量检测的需求。因此，开展宠物饲料及其原料中霉菌毒素检测方法的研究迫在眉睫，对于促进宠物饲料行业的健康发展、保障宠物健康具有重要的现实意义。

1.2国内外研究现状

霉菌毒素的检测方法众多，不同方法各有其特点和适用范围，在宠物饲料及其原料检测领域的应用也有所差异。在国外，针对宠物饲料霉菌毒素检测方法的研究开展较早，技术也相对成熟。美国、欧盟等国家和地区在霉菌毒素检测技术研发方面投入大量资源，取得了一系列成果。例如，高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS/MS）在国外宠物饲料霉菌毒素检测中应用广泛，该方法能够实现多种霉菌毒素的同时检测，灵敏度高、准确性好，可检测出低至μg/kg级别的霉菌毒素。美国分析化学家协会（AOAC）制定了一系列关于霉菌毒素检测的标准方法，为全球相关检测工作提供了重要参考。

在国内，随着宠物饲料行业的快速发展，对霉菌毒素检测方法的研究也日益重视。近年来，国内科研人员在借鉴国外先进技术的基础上，结合我国实际情况，开展了大量研究工作。目前，国内已建立了多种霉菌毒素检测方法，包括国家标准和行业标准。如GB/T30955-2014《饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法》、GB/T30956-2014《饲料中脱氧雪腐