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第十二章单克隆抗体*第1页,共34页,星期日,2025年,2月5日二、动物细胞代谢葡萄糖和谷氨酰胺提供能量和合成代谢的前体葡萄糖受限谷氨酰胺谷氨酰胺:氮源,受限,消耗其他氨基酸葡萄糖代谢:进入糖酵解途径,大部分分解为丙酮酸乳酸,分泌到胞外(积累)丙酮酸还可以转化为乙酰辅酶A,进入TCA循环,彻底氧化为CO2和水4%-8%的少部分葡萄糖进入五糖磷酸途径PPP,转化为4、5、7碳糖和NADPH.5碳糖用于核酸合成,其他中间产物进入脂肪酸代谢、核酸代谢和氨基酸代谢。葡萄糖代谢旺盛,产生大量乳酸,产生细胞毒性。谷氨酰胺代谢:进入氨基酸代谢途径,合成其他氨基酸大多数谷氨酰胺在脱氨酶作用下,生成谷氨酸,并释放氨,产生细胞毒性小部分谷氨酰胺通过转氨作用生成其他嘌呤、嘧啶和氨基糖。谷氨酰胺谷氨酸还原酶α-酮戊二酸TCA能量在快速生长的培养系中,转氨作用是主要代谢途径:谷氨酰胺与丙酮酸和草酰乙酸发生转氨作用丙氨酸和天冬氨酸葡萄糖代谢和谷氨酰胺代谢重叠于丙酮酸常流加葡萄糖代谢和谷氨酰胺,控制整个代谢,避免有毒废物积累第2页,共34页,星期日,2025年,2月5日三、动物细胞的分类原代细胞(primarycell):从动物体内直接分离得到的细胞特点:生长分裂不旺盛,与体内细胞相似传代细胞(passagecell):原代细胞转接后培养的细胞特点:分裂增殖旺盛二倍体细胞系(diploidcell):原代细胞经过传代、筛选、克隆、纯化后,获得的具有一定特征的细胞系。如:W1-38,MRC-5,ZBS等有限细胞系(finitecell):生长和寿命有限的细胞系,二倍细胞系特点:多次传代培养,失去增殖能力,老化死亡(寿命取决于细胞来源的物种、年龄和器官)人细胞:50-60代,胚成纤细胞:人50代;鸡胚30代;小鼠8代第3页,共34页,星期日,2025年,2月5日三、动物细胞的分类(二)无限细胞系(infinitecell):生长和寿命不受限制的细胞系,能连续传代培养。特点:细胞无限分裂,不具有接触抑制现象,不出现异常染色体连续细胞系(continuouscellline)永久性细胞系(immortalcellline)异倍体工程细胞系(engineeredcellline):采用基因工程技术对宿主细胞的遗传物质进行修饰,获得具有稳定遗传的独特性状。获得方法:异倍体化,融合或重组转化细胞系:染色体断裂成为异倍体,失去了正常细胞的特点,具有无限增殖能力。特点:可长期培养,倍增时间短,对培养条件和营养要求较低,适用于大规模培养如:Namalwa,CHO,BHK-21,Ver
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