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效价:指噬菌体悬液的浓度,即每ml样品中所
含有的具侵染性的噬菌体粒子数。;;过程与效价计算
1.将敏感细菌液体培养16-24小时。
2.取300μl敏感细菌悬浮液加入5ml冷却至45℃的0.7﹪琼
脂培养基中,混匀后平铺于已凝固的1.8﹪琼脂培养基
上,凝固待用。
3.以1%peptone为稀释液,将噬菌体原液做10倍序列稀
释,一般稀释至107倍即可;
4.将平板划分为八个区域,以微量移液枪取不同稀释倍数
之噬菌体稀释液各1μl,分别接种;
5.培养8-24小时,待溶菌斑产生后观察并计算其数目。
6.噬菌体效价(pfu/ml)=溶菌斑数×稀释倍数×取样量折
算数
如:噬菌体原液稀释倍数为106,取样量为0.001ml(则
折算数为1000),三个滴定点的溶菌斑数目分别为15、
18、16,则噬菌体原液的效价为:
1/3(15+18+16)×106×1000=1.63×1010(pfu/ml);;;噬菌体效价(pfu/ml)=溶菌斑数×稀释倍数×取样量折算数
例如:噬菌体原液稀释倍数为107,取样量测定量为0.1ml(则取样量折算数为10),三个平板的溶菌斑数目分别为275、252、263,则噬菌体原液的效价为:
1/3(275+252+263)×107×10=2.63×1010(pfu/ml);;噬菌体增殖规律的描述方法
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