A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫竞争分析法的建立与初步应用.pdfVIP

２０２５年５月西南民族大学学报(自然科学版)Ｍａｙ.２０２５

第３期王婷芳ꎬ等:Ａ型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫竞争分析法的建立与初步应用

第５１卷第３期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＭｉｎｚｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)Ｖｏｌ.５１Ｎｏ.３

ｄｏｉ:１０１１９２０/ｘｎｍｄｚｋ２０２５０３００６

Ａ型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫竞争分析法的

建立与初步应用

１１１１２１１

王婷芳ꎬ丹珍翁姆ꎬ卞世傲ꎬ周泷ꎬ扎西央宗ꎬ张志东ꎬ李彦敏

(１.西南民族大学畜牧兽医学院ꎬ四川成都６１００４１ꎻ２.西藏那曲市农牧业(草业)科技研究推广中心ꎬ西藏那曲８５２０００)

摘要:为提高Ａ型ＦＭＤＶ抗体检测的敏感性和特异性ꎬ简化反应步骤ꎬ缩短反应时间ꎬ以兔抗Ａ型ＦＭＤＶ抗体作为

捕获抗体ꎬＡ型ＦＭＤＶ１４６Ｓ作为包被抗原ꎬＡ型特异性的单克隆抗体作为竞争抗体ꎬ鲁米诺作为化学发光底物ꎬ结合化

学发光免疫分析法技术ꎬ建立一种高特异性、高灵敏性、准确快速、操作简便的Ａ型ＦＭＤＶ抗体ｃＣＬＩＡ检测方法.结果

显示ꎬ最佳兔抗Ａ型ＦＭＤＶ抗体包被稀释度为１∶１０００ꎬ最佳抗原浓度为１μｇ/ｍＬꎬ最佳稀释液为２％ＢＳＡ￣ＰＢＳＴꎬ血清最

佳稀释度为１∶１０ꎬ酶标单抗ＢＣ２Ｂ７￣ＨＲＰ最佳浓度为０１μｇ/ｍＬꎬ待检血清和酶标单抗最佳作用时间为３７℃下孵育

３０ｍｉｎꎬ其批内变异系数０.５％~１７.４％之间ꎬ批间变异系数在０.４％~７.９％之间ꎬ具有良好的重复性.通过对１７５份临床

血清的检测ꎬ该方法与液相阻断ＥＬＩＳＡ试剂盒相比ꎬ其相对敏感性为１０２３％ꎬ特异性为１００％.结果表明ꎬ建立的Ａ型

ＦＭＤＶ抗体ｃＣＬＩＡ特异性和灵敏性高ꎬ且能在１５ｈ完成检测ꎬ成功建立了一种快速检测Ａ型口蹄疫病毒抗体的化学

发光免疫竞争分析法(Ａ型ＦＭＤＶ抗体ｃＣＬＩＡ)ꎬ为口蹄疫的有效防控提供了新的技术.

关键词:Ａ型口蹄疫病毒ꎻ化学发光免疫竞争分析法ꎻ抗体检测方法

中图分类号:Ｓ８５２.６５文献标志码:Ａ文章编号:２０９５￣４２７１(２０２５)０３￣０２８１￣０７

Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ

ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅａｓｓａｙｆｏｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｇａｉｎｓｔｆｏｏｔ￣ａｎｄ￣ｍｏｕｔｈｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓｔｙｐｅＡ

１１１１

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２１１

ＺｈａｘｉｙａｎｇｚｏｎｇꎬＺＨＡＮＧＺｈｉｄｏｎｇꎬＬＩＹａｎｍｉｎ

(１ＳｃｈｏｏｌｏｆＡｎｉｍａｌａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＳｃｉｅｎｃｅꎬＳｏｕｔｈｗｅｓｔＭｉｎｚｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１００４１ꎬＣｈｉｎａꎻ