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中国兽医杂志2024,60(4):50-57
ChineseJournalofVeterinaryMedicine
D01:10.20157/j.cnki.zgsyzz.2024.04.007
病毒宏基因组学检测猪博卡病毒
及其遗传进化分析
孙晓瑜1-23,单虎12.3,黄娟1,2.3
(1.青岛农业大学动物医学院,山东青岛266109;2.山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109;
3.山东省兽药诊断试剂工程技术研究中心,山东青岛266109)
摘要:为了探明导致某养猪场中仔猪腹泻的病原,本试验将患病仔猪样本处理并提取核酸后进行病毒宏基因组测序,对测
序结果进行序列比对分析和遗传进化分析,并对样本核酸进行PCR检测验证。结果显示,RNA样本中只注释到A型流感病毒
(H1N1和H3N2),读数比为6.8%,未发现其他猪病相关RNA病毒。DNA样本注释到的病毒主要为猪博卡病毒(PBoV),读数
比为34.5%,命名为PBoV-SDPD-2022;其余猪病相关病毒包括猪巨细胞病毒、猪乳腺腺病毒和猪细环病毒,读数比均小于
1.0%。基于全基因组、NS1基因和VP1基因构建的系统发育进化树均显示,PBoV-SDPD-2022与参考毒株PBoV3_VIRES
HuB01_C1处于同一分支,属于PBoVG3群。与21株参考毒株相比,PBoV-SDPD-2022NS1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序
列同源性分别为49.6%~97.2%和38.5%~95.3%;VP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为47.9%~97.9%
和34.8%~98.8%;NP1蛋白的编码基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为35.2%~98.5%和26.9%~97.4%。与G3群参
考毒株相比,PBoV-SDPD-2022NS1蛋白在第654位点处有1个氨基酸的缺失;VP1蛋白在第151、152位点处有2个氨基酸的插
人,且包含基序YLCPF(VPIaa18~22)和HDLAY(VP1aa41~45);NP1蛋白在第15、16.3536、212位点处发生氨基酸的缺失,
在第95位点处有1个氨基酸的插入。PCR检测证实样本核酸为PBoV阳性。结果表明,导致该养猪场仔猪腹泻的优势病原是
G3群PBoV。本试验有助于进一步了解我国PBoV基因组序列特征,并为未来PBoV流行病学调查提供了参考依据。
关键词:病毒宏基因组学;猪博卡病毒;遗传进化分析
中图分类号:S85文献标志码:A文章编号:0529-6005(2024)04-0050-07
DetectionofPorcineBocavirusbyViralMacrogenomicsandAnalysisofitsGeneticEvolution
SUNXiaoy.,SHANHu-,HUANGJuan.3
(1.CollegeofVeterinaryMedicineQingdaoAgriculturalUniversityQingdao266109China;2.ShandongProvincialKey
LaboratoryofPreventiveVeterinaryMedicine,Qingdao266109,China;3.ShandongProvincialVeterinaryMedicine
DiagnosticReagentEngineeringTechnologyResearchCenter,Qingdao266109,China)
Abstract:Inordertoexplorethepathogencausingdiarrheainpigletsonapigfarm,thisstudyprocessedandextractednucleic
acidsfromdiseasedpigletsamplesforvirusmetagenomicsequencing.Thesequencingresu
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