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猪蛔虫感染期幼虫差异表达基因解析：鉴定、克隆与深度分析

一、引言

1.1研究背景

猪蛔虫病（Ascariosis）是由猪蛔虫（Ascarissuum）寄生于猪小肠引起的一种线虫病，在全球范围内广泛传播，无论是集约化养猪场还是散养猪群，都难以幸免。据相关资料显示，我国猪群的感染率处于17%-80%的区间，平均感染强度为20-30条。仔猪一旦感染猪蛔虫病，其生长发育会受到严重影响，增重率可下降30%。病情严重的仔猪，生长发育甚至会停滞，最终形成“僵猪”，更有甚者会导致死亡。因此，猪蛔虫病堪称造成养猪业损失最为严重的寄生虫病之一。

猪蛔虫病的流行极为广泛，在饲料管理欠佳的猪场，几乎都有该病发生，尤其是3-5月龄的仔猪，最容易大量感染猪蛔虫，进而严重影响其生长发育，甚至导致死亡。这主要是因为：其一，蛔虫的生活史较为简单；其二，蛔虫繁殖能力极强，产卵数量巨大，每条雌虫每天平均可产卵10万-20万个；其三，虫卵对各种外界环境具有强大的抵抗力，虫卵拥有4层卵膜，这4层卵膜能够保护胚胎免受外界各种化学物质的侵蚀，维持内部湿度，阻挡紫外线的照射，再加上虫卵的发育在卵壳内进行，幼虫得到了卵壳的有效保护。所以，虫卵能够在外界环境中长期存活，极大地增加了感染性幼虫在自然界的积累。有研究表明，猪蛔虫能在疏松湿润的耕地或园土中存活长达3-5年。而且，虫卵具有黏性，容易借助粪甲虫、鞋靴等进行传播。

猪蛔虫幼虫和成虫阶段所引发的症状和病变存在明显差异。幼虫移行至肝脏时，会致使肝组织出血、变性和坏死，进而形成直径约1cm的云雾状蛔虫斑；移行至肺时，则会引发蛔虫性肺炎。成虫寄生在小肠时，会机械性地刺激肠黏膜，导致腹痛。当蛔虫数量众多时，常常会凝集成团，堵塞肠道，最终造成肠破裂。有时，蛔虫还会进入胆管，引发胆管堵塞，导致黄疸等症状。成虫能够分泌毒素，作用于中枢神经和血管，引发一系列神经症状。此外，成虫会夺取宿主大量的营养，使得仔猪发育不良，生长受阻，被毛粗乱，这常常是导致“僵猪”的一个重要因素，严重时可致使仔猪死亡。

当前，对猪蛔虫病的防治主要依赖药物，但长期、大量且不合理地使用抗蠕虫药物，已经引发了诸多严峻问题。一方面，寄生线虫的耐药性不断增强，使得药物的驱虫效果大打折扣；另一方面，药物残留问题不仅对动物产品质量安全构成威胁，还会对环境造成污染。因此，探寻新的、有效的防治途径已迫在眉睫。从基因层面深入研究猪蛔虫的致病机制以及宿主的免疫应答机制，进而研发出新型的防治方法，具有极其重要的意义。通过鉴定猪蛔虫感染期幼虫的差异表达基因，能够深入了解其在感染过程中的分子机制，为寻找新的药物作用靶点和疫苗候选分子提供坚实的理论依据。

1.2猪蛔虫感染期幼虫研究现状

猪蛔虫感染期幼虫的研究涉及多个关键层面，这些研究成果对于深入了解猪蛔虫病的发病机制、传播途径以及防治策略的制定具有重要意义。

在生物学特性方面，学界已取得了较为丰富的成果。猪蛔虫的生活史相对简单，虫卵随粪便排出体外后，在适宜的环境条件下，如温度在28-30℃、潮湿且氧气充足时，经过10天左右，卵细胞发育为第1期幼虫，再经生长和一次蜕化，成为第2期幼虫，此时即具有感染性。当猪吞食感染性虫卵后，幼虫在猪体内开启复杂的移行历程。它们先进入肠壁血管，随血液循环抵达肝脏，在肝脏内造成肝组织出血、变性和坏死，形成直径约1cm的云雾状蛔虫斑。随后，幼虫继续沿腔静脉、右心室和肺动脉移行至肺脏，从肺毛细血管进入肺泡，在此经历一定的发育阶段，再沿支气管、气管上行，随黏液进入会厌，经食道最终到达小肠，发育为成虫。从感染性虫卵被猪吞食到发育为成虫，整个过程大约需要2-2.5个月。成虫在猪小肠内寄生，以黏膜表层物质及肠内容物为食，通常在猪体内寄生7-10个月后，会随粪便排出体外。

致病机制的研究同样备受关注。幼虫在猪体内移行时，对肝脏和肺脏等器官会产生严重的损害。移行至肝脏时，引发肝组织出血、变性和坏死；移行至肺时，则导致蛔虫性肺炎，使猪出现咳嗽、气喘、体温升高等症状。成虫寄生在小肠时，不仅会机械性地刺激肠黏膜，引发腹痛，还会夺取宿主大量的营养，导致仔猪发育不良、生长受阻、被毛粗乱，严重时可形成“僵猪”甚至死亡。此外，当蛔虫数量众多时，常常会凝集成团，堵塞肠道，导致肠破裂；有时蛔虫还会进入胆管，造成胆管堵塞，引发黄疸等症状。成虫分泌的毒素作用于中枢神经和血管，会引起一系列神经症状，进一步加重猪的病情。

在诊断技术上，目前主要采用粪便检查法，对于2个月以上的仔猪，常用饱和盐水漂浮法检查虫卵。正常的受精卵呈短椭圆形，黄褐色，卵壳内有一个受精的卵细胞，两端有半月形空隙，卵壳表面有起伏不平的蛋白质膜，通常比较整齐；未受精卵则偏长