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AGRICULTURAE华北农学报·2024，39（增刊）：344-352

BOREALI-SINICA

PTH1-34对鹿茸间充质干细胞成骨机制的转录组学分析

肖,谭展清,刘

邢宝瑞}3,赵海平,李光玉,马泽芳,孙红梅”,胡振

（1.青岛农业大学动物科技学院，山东青岛2661092.中国农业科学院特产研究所，吉林长春130022；

3.济南市口腔医院，山东济南250001）

摘要：PTH1-34对鹿茸间充质干细胞具有促成骨作用，旨在利用高通量无参转录组测序方法探索PTH1-34促进

鹿茸间充质干细胞成骨的可能机制。选用第3代鹿茸间充质干细胞，按试验要求随机分为3组（对照组、诱导组、PTH

1-34干预组），每组3个重复，诱导组添加成骨诱导液诱导鹿茸间充质干细胞成骨分化,PTH1-34干预组在诱导组基

础上添加10nmol/LPTH1-34。培养21d,采用碱性磷酸酶和茜素红染色的方法对标志物和钙结节进行鉴定，鉴定完

毕后，使用TRIzol法进行总RNA提取并采用第二代测序技术（Next-GenerationSequencing），基于Ilumina测序平台，对

这些文库进行双末端测序。添加浓度为10mmol/LPTH1-34进行成骨诱导,可明显增加鹿茸间充质干细胞碱性磷酸

酶活性和钙结节的产生量。因与NCBI所发布的鹿科动物基因序列比对效率低于50%,选择了无参转录组测序。通

过对差异基因富集分析，共筛选出5737个差异表达基因,其中1877个上调3860个下调；G0富集分析显示，在生物

过程作用下，差异基因的种类主要包括细胞运动、细胞增殖、细胞迁移、骨发育、血管生成和形态发生相关；通过筛选，

找到了8个与成骨相关基因：RUNX2、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB；2个与细胞自噬相关基因：Wi-

Pi2、ATG14;4个与血管生成相关基因：UNC5B、SHC1、FLNA、TNFSF15,使用qRT-PCR方法进行验证,结果与测序结果

一致;转录因子预测相关性较高的家族为zf-C2H2,并筛选到了成骨转录因子SP7。PTH1-34可通过上调RUNX2、

SP7、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB的mRNA表达来促进鹿茸间充质干细胞的成骨分化；可能通过抑

制血管生成和细胞自噬来调节鹿茸的骨化过程。

关键词：鹿茸；甲状旁腺素1-34；间充质干细胞；成骨诱导；转录组学

中图分类号：S825文献标识码：A文章编号：1000-7091（2024）增刊-0344-09

doi:10.7668/hbnxb

TranscriptomicAnalysisofPTH1-34ontheOsteogenesis

MechanismofAntlerMesenchymalStemCells

XINGBaoruil-3,ZHAOHaiping,LIGuangyu,MAZefang,

SUNHongmei?,HUXiao,TANZhanqing,LIUZhen

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,QingdaoAgriculturalUniversity,Qingdao:266109,China;

2.InstituteofSpecialtyProducts,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Changchun

n130022,China;

3.JinanStom