专题五课题1DNA的粗提取与鉴定.pptxVIP

课题1DNA的粗提取与鉴定;一、实验思路;一、课题重点与难点;问题思考与讨论：;当氯化钠的物质的量浓度为2mol／L时，DNA的溶解度最大，浓度为0．14mol／L时，DNA的溶解度最低。运用这一原理，能够使DNA在盐溶液中溶解或析出;DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则能够溶于酒精。运用这一原理，能够将DNA与蛋白质进一步分离;（二）、DNA的鉴定原理;三、DNA的粗提取与鉴定的实验设计;动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可;①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜.;答：研磨不充足会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验成果，造成看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等.;讨论：为什么重复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？;讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？;（四）DNA的析出与鉴定;;2、DNA的鉴定;1、DNA的溶解度最低时，NaCl的物质的量浓度为（）

A2mol/lB0.1mol/l

C0.14mol/lD0.015mol/l

2、在向溶解DNA的NaCl溶液中，不停加入蒸馏水的目的是（）

A加紧DNA溶解的速度

B加紧溶解杂质的速度

C减小DNA的溶解度，加紧DNA析出

D减小杂质的溶解度，加紧杂质的析出;3、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不停加入蒸馏水,在这个过程中DNA的溶解度变化状况分别是

A减小;减小B增大;增大

C先减小后增大D增大;减小;4、与析出DNA粘稠物有关的叙述，不对的的是

A操作时缓慢滴加蒸馏水，减少DNA的溶解度

B操作时用玻棒轻缓搅拌以确保DNA分子的完整

C加蒸馏水能够同时减少DNA和蛋白质的溶解度

D当丝状粘稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度能够认为是0.14mol/L;以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取;环节;环节;1、准备鸡血细胞液;②柠檬酸钠作用;讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？;2、DNA的提取与鉴定;讨论：;②溶解细胞核内的DNA;沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现，注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水，溶液中出???的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水（这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相称于0.14mol／L）;讨论：加入蒸馏水的目的？;④滤取含DNA的粘稠物;⑤将DNA的粘稠物再溶解;⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液;⑦提取含杂质较少的DNA;讨论：;取两支20mL的试管，各加入氯化钠的物质的量浓度为0．015mol／L的溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化;讨论：;答：整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌”;过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，因此要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层;③两次析出