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DOI:10.13938/j.issn.1007-1431
中国南方果树,2025,54(2):103-107113
火龙果叶绿体基因组结构与序列分析
吴民富,李莎1,谭艺涵²,罗林3,吴民华,黄琼林4
1佛山职业技术学院食品科学系,广东佛山,5281372广东医科大学第一临床医学院,广东湛江,524023;
3华南农业大学食品学院,广州,510640;4广东医科大学基础医学院,广东湛江,524023
摘要为解析火龙果Selenicereusundatus叶绿体基因组结构和序列特征,并探讨其系统进化关系,运用高通量测序技术开
展火龙果叶绿体基因组测序,使用生物学信息技术对其组装和注释,分析其密码子偏好性、简单重复序列、与近缘物种间序列
变异的关系,并构建系统进化树。结果表明,火龙果叶绿体基因组133071bp,呈环状双链四段式结构,包括大单拷贝区
(LSC)68001bp,小单拷贝区(SSC)21716bp和两个12477bp的反向重复区(IR)。火龙果叶绿体基因组共注释到基因118
个,其中蛋白编码基因76个,rRNA基因4个、tRNA基因38个。火龙果叶绿体基因组密码子偏好以A/U(T)结尾,在检测到
的66个简单重复序列(SSR)中,大多数是A/T碱基形成的单核苷酸重复基序。序列对比和系统进化分析显示,火龙果与同
科的硫磺团扇和长枪团扇具有较近的亲缘关系。本研究首次测得火龙果叶绿体基因组全序列,明确其叶绿体基因组结构和
序列特征,为火龙果的种植栽培和资源开发等研究提供了基因组信息。
关键词火龙果;叶绿体;基因组;序列分析;系统进化关系
叶绿体是绿色植物进行光合作用的细胞器,是拥有独立稳定基因组的半自主型细胞器[。叶绿体基因
组包括1个大单拷贝区(LSC)、1个小单拷贝区(SSC)以及间隔在2个SC之间的一对反向重复区(IR),分别
称为IRA和IRB,即LSC、IRA、SSC和IRB依次排列,最终呈现环状四分体结构[2]。叶绿体基因组结构较
简单,分子量较小,相对于核基因组更加保守,且进化速率较慢,故其在不同物种间具有更好的统一性3]。随
着叶绿体基因组测序技术日趋完善,以及序列分析方法的快速开发,叶绿体基因组被广泛用于物种鉴定、系
统发育及遗传进化等研究[1]。
火龙果是仙人掌科蛇鞭柱属多年生草本植物量天尺Selenicereusundatus的果实,是味道清甜、营养丰
富的热带亚热带水果。火龙果原产于中美洲,20世纪90年代引种至我国广东、广西、海南等省(区),目前种
植面积超过7万hm²[5-6]。此外,火龙果的花和茎还可药用,茎能舒筋活络、解毒,而花则有清肺热、止咳和滋
补的功效,可用于治疗肺部和肠道疾病[7。目前有关火龙果的研究多集中于栽培嫁接[8}、病虫害防治[9]等方
面,鲜见基于叶绿体基因组的火龙果遗传多样性、物种进化等研究。本研究利用Illumina测序技术测序火龙
果叶绿体基因组,分析其结构组成、密码子偏好、简单重复序列等,结合其近缘物种的叶绿体基因组比较,构
建系统进化树以探讨其进化发育地位,以期为火龙果的分类地位、遗传多样性、分子育种等研究奠定基础。
1材料与方法
1.1材料及测序
“金都1号”红心火龙果植株采集于广西玉林市容县松山镇沙田村,取其新鲜绿色无病虫害叶片,采用磁
珠法植物DNA基因组提取试剂盒(北京康为世纪生物科技股份有限公司产)分离其总DNA,随后利用
DNA文库制备试剂盒(美国Illumina公司产)构建高通量测序所需的DNA文库,使用IlluminaNovaseq测
序平台进行火龙果DNA双端测序。
1.2叶绿体基因组组装与注释
使用SPAdes软件进行火龙果叶绿体基因组组装,通过Bandage软件对拼接后的序列进行可视化和校
正,并使用PGA软件完成序列注释,采用OGDRAW软件绘制火龙果叶绿体基因组的结构图谱;利用Ban-
kIt软件将火龙果叶绿体基因组序列提交至GenBank保存,序列登记号为OQ809070。
收稿日期:2024-02-20;修回日期:2024-03-17
基金项目:广东省基础与应用基础研究基金(2020A1515110332);湛江市科技计划项目(2019A01008)资助。
第一作者:吴民富(1986一),男,博士,副教授,主要从事食品检测研究。E-mail:wmf@fspt.edu.cn
通信作者:李莎(1990一),女,博士研究生,助教,主要从事食品检测研究。E-mail:lisha@fspt.edu.cn
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