特殊毒性作用及其试验与评价方法.pptxVIP

特殊毒性及其试验★特殊毒性试验:?致突变试验?致畸试验?致癌试验?繁殖试验（生殖试验）?行为试验

一、致突变试验（一）细菌回复突变试验（Amestest）(1)原理试验菌种野生型突变型鼠伤寒沙门氏菌his+his-在缺乏his的培养基能生长不能生长主要是检查受试物引起遗传物质结构的改变及其引起的性状变异的试验his-AA缺乏

Ames试验原理：野生型His+突变型His-正向突变回复突变物理化学等因素处理受试物His-培养基接种能生长有致突变性不能生长无致突变性+

使用菌株Ames1975年推荐的沙门氏菌标准菌株为：TA98,TA100,TA1535,TA1537,TA1538;1983年改推荐用:TA97,检测移码;TA98,检测碱基置换;TA100,检测碱基置换及移码;TA102,检测碱基置换及移码。

试验方法致突变试验分体内体外两种情况：01体内试验：可检测直接及间接致突变物，不必加S9此法称宿主间介法。03体外试验：检测间接致突变物，需加S9(体外代谢活化系统)，此法称微粒体间介法。02

关于突变类型(4)关于突变类型分为:基因突变和染色体畸变1.基因突变(genemutation)或称点突变(pointmutation):是指不能用光学显微镜直接观察到的遗传物质损伤基因突变是遗传物质在分子水平上的改变。包括：碱基置换（basesubstitution）移码（frameshift）大段损伤（Largedeletionorinsertion）

①碱基置换：某一碱基脱落或配对性能改变DNA复制时碱基错配（mispairing)第二次DNA复制时按正常配对遗传下去*转换(transition)：AGCT*颠换(transversion):ATGC无论转换或是颠换都只涉及一对碱基,故称点突变。*后果：三联密码子的改变，可能出现同义密码，错义密码或终止密码，从而使基因表达改变。

01移码02是DNA中增加或减少一对或几对不等于3的倍数03的碱基改变所造成的突变。04这种突变可造成整个DNA或一个基因阅读框架的05改变。06后果：移码易造成致死性突变；

③大段损伤是指DNA链的大段缺失或插入。可能涉及数以千计的Nt（核苷酸）。*小缺失（smalldeletion):缺失的Nt远远小于显微镜的观察能力。*插入（insertion):一段游离Nt整合到另一染色体的某一位置。*转座子（trasposon):在质粒（plasimd)与质粒之间和质粒与染色体之间可能出现转移位置的小段DNA。这种位置的转动称为转座（transposition)*后果：a.gene突变；b.产生新的genec.染色体畸变；d.生物进化。

结构畸变1裂隙和断裂(gapandbreak):2仍保持线状连接者为裂隙,无线状连接者为断裂3无着丝粒断片和缺失(acentricfragment4anddeletion)5微核(micronucleus):无着丝粒断片。6微小体（minutebody):小于染色体宽度的无着丝粒断7片,常成双出现。8环状染色体(ringchromosome)9倒位(inversion):断片倒转180°再重接。10染色体畸变

*插入和重复（insertionandduplication)*易位（translocation)*染色体交换（chromatidexchange):指两条或多条染色单体断裂后变位重接。分为：内换（intrachange):同一染色体内的染色单体交换互换（interchange):不同染