环境消毒监测与验证.ppt

附录B:B.3培养基平皿培养及保存制备好的培养基平皿宜在2～8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜的方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期的标记。GB/T16293-2010/GB/T16293-2010第31页，共81页，星期日，2025年，2月5日1、TSA用于细菌取样。培养温度/时间：30～35℃不少于2天。2、SDA用于霉菌和酵母菌取样。培养温度/时间：20～25℃不少于5天。环境测试培养基：第32页，共81页，星期日，2025年，2月5日3、用户认可并验证了的培养基。以上摘自：GB/T16293-2010GB/T16294-2010环境测试培养基：第33页，共81页，星期日，2025年，2月5日1、忽视洁净环境中的影响因素2、忽视培养基的选择环境监测中常忽视的两个方面：第34页，共81页，星期日，2025年，2月5日（1）API的残留（2）消毒剂/杀孢子剂的残留1、忽视洁净环境中的影响因素第35页，共81页，星期日，2025年，2月5日抗菌素药物活性成分API第36页，共81页，星期日，2025年，2月5日消毒剂/杀孢子剂常见的化学消毒剂：1、酚类2、醛类3、过氧化氢类4、季胺盐类化合物5、以上混合物第37页，共81页，星期日，2025年，2月5日（1）选择性低下，营养全面（2）含有中和剂（3）“无菌”平板培养基2、忽视培养基的选择第38页，共81页，星期日，2025年，2月5日营养琼脂胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基的选择第39页，共81页，星期日，2025年，2月5日参见：“中国药典”2010年版附录109页附录XIJ表1：“常见干扰物中和剂或灭活方法”中和剂的使用：第40页，共81页，星期日，2025年，2月5日青霉素酶（β-内酰胺酶）可以有效的水解β-内酰胺类抗生素。包括：-青霉素G-氨基青霉素类，如氨苄西林、阿莫西林、匹氨西等-羧基青霉素类，如羧苄西林、替卡西林等-脲基青霉素类，如呋苄西林、美洛西林等-头孢Ⅰ、Ⅱ酶（1）：青霉素酶第41页，共81页，星期日，2025年，2月5日头孢菌素酶可以有效水解头孢类抗生素Ⅲ及以上的头孢类抗生素。

包括：头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢克洛、头孢呋辛、头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松等。

酶（2）：头孢菌素酶第42页，共81页，星期日，2025年，2月5日抵抗消毒剂的中和剂：1、吐温-80能够消除六氯酚和含汞类消毒剂的影响。2、卵磷脂能够消除洗必泰类消毒剂的影响。3、卵磷脂、吐温-80能够消除季胺类化合物（苯扎溴铵、苯扎氯铵等）消毒剂的影响。第43页，共81页，星期日，2025年，2月5日无菌平板培养基（预灌装无菌培养基）理想的环境测试培养基：第44页，共81页，星期日，2025年，2月5日1、A级、B级、C级洁净区直接使用2、室温储存3、有效期长4、无菌包装、包装完整5、特制平板6、培养基灌装量大无菌平板培养基优点：第45页，共81页，星期日，2025年，2月5日55mm接触平板（RodacPlate）ReplicateOrganismDetectionandCountingGMP2011和EUGMP:-平板尺寸：15X55mm-取样单位面积：25cm2第46页，共81页，星期日，2025年，2月5日接触板的取样面积：24～30cm2USP〈1116〉

洁净室和其它控制环境的微生物评估第47页，共81页，星期日，2025年，2月5日取样面积：不小于20cm2。取样方法：采样时培养基表面应与采样点接触不少于10s，向整个接触表面施加恒定均匀的压力（如施加的质量约为25g/cm2），不得有环形或线性运动，装置有接触并拿开后，要加盖并尽快用适当的培养条件培养。ISO14698洁净室及其相关控制环境第48页，共81页，星期日，2025年，2月5日目前各类官方的指导原则中，很少有对洁净环境微生物监测方法提出要求的。目前各类官方的指导原则中，各种微生物只有生长在如下两种固体表面上的测试方法