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巨噬细胞吞噬现象的实验观察
一.实验目的:
1.观察巨噬细胞吞噬全过程和意义。
2.掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。
二.实验原理
吞噬细胞由骨髓干细胞分化生成,具有非特异性免疫功能。当病
原微生物或其他异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又有
趋化性,能响应招引因子的招引,产生活跃的变形运动,主动向病原
体或异物移动,在接触到病原体或异物时,即伸出伪足将之包围,并
内吞入细胞,形成吞嗜体,继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生
融合形成吞噬性溶酶体,通过其水解酶作用,将病原体杀死,消化分
解,最后将不能消化的残渣排除细胞外。
三.实验用品
1.器材:显微镜解剖盘剪刀镊子载玻片盖玻片注射器吸管
2.试剂:A.0.85%生理盐水
B.alsever溶液(葡萄糖2.05g柠檬酸钠0.89g柠檬酸
0.05g氯化钠0.42g蒸馏水100ml)将alsever溶液ph调至7.2,
高压灭菌10分钟,保存于4℃冰箱中。
C.0.4%台盼蓝染液
D.4.0%淀粉肉汤(牛肉膏0.3g蛋白胨1.0g氯化钠0.5g
蒸馏水100ml含台盼蓝染液)加热后加入可溶性淀粉6.0g,促使溶
解,再煮沸灭菌,置4℃冰箱中保存,用时水浴融化,加入适量台盼
1
蓝染液混匀,使其成蓝色。
3.材料:A.小白鼠
B.1%鸡红细胞悬液(从健康鸡翼静脉采血1ml,放入盛有
4mlalsever溶液瓶中,混匀置4℃冰箱中备用。用时加0.85%生理
盐水离心,洗涤两次,再用生理盐水配成1%浓度悬液。)
四.实验方法
1.实验前一天给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml。
2.试验时,将注射过淀粉肉汤的小白鼠腹腔注射1%鸡红细胞悬
液1ml,轻按小鼠腹部,使悬液分散。
3.二十分钟后,用颈椎脱臼法处死小鼠。
4.将小鼠置于解剖盘中,剪开腹部,把内脏推向一侧,用不装针
头的注射器或吸管取腹腔液。
5.取一干净载玻片,滴一滴腹腔液,盖上盖玻片,置显微镜下观
察。
五.实验结果
2
10*100
图中椭圆形有核淡黄色细胞为鸡红细胞;较大的呈圆形或不规则
细胞,内含蓝色颗粒的为巨噬细胞,仔细观察玻片,可见巨噬细胞吞
噬红细胞的过程。
六.结果分析
1、通过观察,可发现巨噬细胞有伪足和细胞膜,伪足能够将外来异
物包围,将外来物黏着在巨噬细胞的周围,细胞膜通过其流动性将外
来异物吞噬并形成吞噬泡。
2、在显微镜下能观察到吞噬的动态过程,一个吞噬细胞可吞噬一到
多个红细胞并将其分解。
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