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二、朗伯-比尔定律朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即A=κcl式中比例常数κ与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。朗伯-比尔定律是紫外-可见分光光度法的理论基础。第21页,共49页,星期六,2024年,5月三、吸光系数当l以cm,c以g/L为单位,κ称为吸光系数,用a表示。A=acla的单位为L/(g.cm)第22页,共49页,星期六,2024年,5月当l以cm,c以mol/L为单位,κ称为摩尔吸光系数,用ε表示。ε的单位为L/mol.cm,它表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度。摩尔吸光系数第23页,共49页,星期六,2024年,5月比吸光系数比吸光系数是指百分含量为1%,l为1cm时的吸光度值,用表示。第24页,共49页,星期六,2024年,5月四、偏离朗伯-比耳定律的因素(1)入射光为非单色光(3)光程的不一致性。光源不是点光源,比色皿光径长度不一致,光学元件的缺陷引起的多次反射等,均造成光径不一致,从而与定律偏离。(2)溶液的不均性。实际样品的混浊,加入的保护胶体,蒸馏水中的微生物,存在散射以及共振发射等,均可吸光质点的吸光特性变化大。第25页,共49页,星期六,2024年,5月§3.紫外-可见分光光度计一、主要部件的性能与作用基本结构:光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统↑样品第26页,共49页,星期六,2024年,5月在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源1光源热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。第27页,共49页,星期六,2024年,5月单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。2单色器单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。第28页,共49页,星期六,2024年,5月吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。3吸收池吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。第29页,共49页,星期六,2024年,5月4检测器检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。5信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。第30页,共49页,星期六,2024年,5月二、
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