侵袭性真菌感染形态学诊断.pptx

侵袭性真菌感染的形态学诊断

第六届全国侵袭性真菌病实验室诊断及

临床治疗新进展研讨会汇报李晓红

生物安全柜

涂片(10%KOH、棉酚兰)丝状菌压片

真菌室

封闭式实验室脚感开门器

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28℃和35℃恒温恒湿培养箱

真菌常规培养28℃、真菌药敏35℃(检测双相真菌必备)

显微镜观察形态学10%KOH压片

快速鉴定非常重要的步骤

培养基、试剂、鉴定药敏

●沙保弱琼脂斜面

·科玛嘉显色培养基(CHROMagar)

沙保弱琼脂(Sabouraudagar,SDA)平皿

·脑心浸液培基(BHI)

●乳酸棉酚蓝

●真菌KOH压片

·

·

●API20C试剂盒

●VITEK2YST鉴定卡

●ATBFUNGUS3酵母菌药敏试验·真菌Etest药敏试验

土豆培养基(Potatoagar,PDA)

●引起侵袭性感染的真菌是指侵袭深部组织和内脏，引起全身性感染的病原真菌或条件致病真菌

●主要包括念珠菌属、隐球菌菌属、曲霉属、毛霉属和双相型真菌等，常见双相型真菌有组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌等

常见引起侵袭性感染的真菌有那几种

显微镜观察形态学是非常重要的步骤

●某些真菌特异性结构是在感染病症，是显微镜直接检查确诊如：卡氏肺孢子虫菌孢囊的检测(六胺银染色)

13p0681痰,感染内科憋气(HIV+)

13p0854肺泡灌洗液，ICU感染性休克呼吸衰竭

13W1998神经科门诊CSF墨汁染色(+)

09W7612CSF新型隐球菌

(20倍低倍镜、40倍高倍镜)

儿科发热待查

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13R588痰呼吸科诊断：间质性肺炎

涂片：有隔菌丝45℃高度可疑曲菌(报危急!)

培养：烟曲霉

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10W8601胸水革兰染色-低倍镜-油镜

(诊断：肺癌痰培养克柔、白念、热带)

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13R3268消化内科病房痰革兰染色：酵母样孢子假菌丝

培养：白念、鲍曼

痰、支气管吸取物、便均培养：白念、光滑

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13z6088分泌物(急诊内科-消化科)

诊断：溃疡性结肠炎

涂片：酵母样孢子假菌丝大量、培养：白念

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12R12739痰血液科诊断：浆细胞白血病

涂片：关节孢子、芽生孢子、菌丝及断裂后形成的孢子

培养：阿萨希毛孢子菌

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13R330痰诊断：卵巢癌复发

涂片：有隔菌丝培养：地霉属

(长方形关节孢子有角部发芽、没有芽孢)

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13r2231痰国际医疗部

诊断：不明原因发热

需氧血培养1次痰培养+涂片1次

培养(-)涂片提示：可疑努卡菌建议复查

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13xr750痰涂片(未做努卡检查)

免疫内科病房诊断：皮肌炎、支气管扩张

弱抗酸(+)报危急!培养+药敏：圣乔治教堂努卡菌(Nocadiacvriacigeorgica)

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采血及无菌部位标本送检

(需氧、厌氧、儿童瓶、分支杆菌快速/真菌)检验中报警

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2014-8-28PUMCHxxl

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需氧瓶12.24h报警

涂片找到孢子加种显色培养基白念珠菌纯培养涂片

血培养阳性瓶直接涂片

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B07K04681血培养35.38h报警API20CAUX鉴定近平滑念珠菌

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13B15620外周血56h报警支气管扩张

直接革兰染色有隔真菌丝

土豆培养基2天，大分生孢子纺锤形

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13B15620外周血

土豆琼脂8天菌落正反面呈橘红色半裸镰刀菌?

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细菌室在此患者诊治过程中与临床沟通对后

续的诊治有所提示

●病例特点：

咳黄色痰10余年，间断有发热。陈旧性肺结核35年，2012年出现活动后气短

●CT影像诊断：

印象：双肺多发斑片影伴支气管扩张考虑感染性改变可能

●痰培养绿脓杆菌，特治星—泰能—可乐必妥

●PCT(-)

●9月26日G实验：60pg/ml正常

●TB细胞亚群：B细胞比例降低，NF细胞比例升高，CD8+T细胞比例稍低，纯真CD4+T细胞比例降低，CD8+T细胞有异常激活

10月12日抽外周血需氧瓶56小时报警，直接涂片大量有隔菌丝

●10月13日发热38℃,患者自动要求出院

●10月22日外周血培养镰刀菌属

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真菌室培养阳性率最高的丝状真菌

●曲霉菌属：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、杂色曲霉和构巢曲霉等是常见的致病菌

●可从痰、支气管灌洗液、肺组织、血、外耳道、鼻窦、腹膜液等标本中分离到

●如果