《生物产品分析与检验技术》课件——葡萄糖酸含量的测定.pptxVIP

葡萄糖酸含量的测定

葡萄糖酸简介葡萄糖酸是一种有机化合物，是由葡萄糖的醛基经氧化生成。天然葡萄糖酸存在于水果、蜂蜜和葡萄酒中。在食品生产中，葡萄糖酸主要用作蛋白凝固剂、食品防腐剂和酸度调节剂。在医药生产中，可用于生产葡萄糖酸盐。

葡萄糖酸测定方法葡萄糖酸的测定方法主要有异羟肟酸比色法、高碘酸氧化法、酶法和高效液相色谱法。

发酵液中葡萄糖酸含量测定---异羟肟酸比色法

测定原理葡萄糖酸在酸性条件下发生内酯化，形成的内酯与羟胺碱反应，生成异羟肟酸。异羟肟酸遇FeCl3能生成异羟肟酸-Fe3+有色络合物，可以通过分光光度比色法定量分析葡萄糖酸的含量。

仪器与器具仪器设备可见分光光度计电子天平可调式电炉玻璃器皿比色管10mL容量瓶100ml移液管、移液枪

试剂与溶液配制0.10mol/L的葡萄糖酸钠标准储备液和4mol/L的HCl溶液，低温保存。在测定时分别取不同体积的葡萄糖酸钠标准储备液，配制成浓度分别为1、2、4、8mmol/L的葡萄糖酸钠标准工作液，用4mol/L的HCl溶液调节pH值=1.5；备用。

试剂与溶液盐酸羟胺与NaOH混合试剂：配制4mol/L盐酸羟胺溶液和4mol/L的NaOH溶液，低温保存。使用时，将等体积的盐酸羟胺和NaOH混合，混合后pH值为8.0。配制的溶液应在4h内使用。FeCl3混合试剂：事先配制好0.37mol/L的FeCl3溶液和0.1mol/L的HCl溶液。使用时等体积混合。

葡萄糖酸钠标准曲线的绘制标准曲线系列浓度溶液的制备首先准备好5支、10ml具塞比色管，用记号笔标记为0、1、2、3、4；用移液枪分别移取浓度为1、2、4、8mmol/L的葡萄糖酸钠标准工作溶液1ml，依次加入编号为“1、2、3、4”的具塞比色管中；同时移取1ml去离子水，加入“0”号空白比色管中，用4mol/L盐酸溶液调节pH=1.5；加热30min，冷却，依次加入2ml羟胺碱、1ml4mol/L的盐酸溶液和1mLFeCl3试剂，显色。

葡萄糖酸钠标准曲线的绘制按下表在各管中加样，制备葡萄糖酸钠标准曲线系列浓度溶液比色管编号01234标样浓度（mmol/L）0.01.02.04.08.0标准溶液体积/mL01.01.01.01.0去离子水/mL1.00000盐酸羟胺和NaOH混合液/mL2.02.02.02.02.0FeCl3和HCl的混合溶液/mL1.01.01.01.01.0

葡萄糖酸钠标准曲线的绘制吸光度测定以空白管对照，在500nm波长下，测定溶液吸光度值；以葡萄糖酸钠标准溶液浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，进行标准曲线的绘制。注意：测定工作在10min内完成。要求提前打开分光光度计，调节到正常测定工作状态，确保溶液吸光度值测定工作在10min内完成。

试样中葡萄糖酸含量的测定步骤测定前将待测样品稀释一定倍数，制成样品稀释液。用移液枪分别移取1mL待测样品稀释液，用4mol/L的盐酸溶液调节pH=1.5，其余处理步骤同上；以空白做对照，完成样品溶液吸光度测定。从标准曲线图上查出样品溶液葡萄糖酸的含量，并及时填写检测结果原始记录单；

结果记录与计算式中：C---样品溶液中葡萄糖酸的含量，mmol/L；C1---从标准曲线上查出的葡萄糖酸的含量，mmol/LF---样品溶液的稀释倍数。计算公式：

课程小结通过本次课程内容的讲解，相信大家已经熟悉了葡萄糖酸含量的测定原理、样品测定具体操作过程，希望同学们课后加强实操练习，熟练掌握葡萄糖酸含量的测定方法。

同学们，加油！