3.1.2 重组DNA技术的基本工具高二下学期生物人教版选择性必修三.pptxVIP

基因工程发展历程;基因工程;思考-讨论;第三章基因工程

第1节重组DNA技术的基本工具;从社会中来;“工欲善其事，必先利其器”。在培育转基因番木瓜时，既要在体外对含有所需基因的DNA分子“切割”、改造和“拼接”；又要将重组DNA分子导入番木瓜体内，并使其表达。;一、限制性内切核酸酶—“分子手术刀”;;1.请结合限制酶的作用特点，回答以下问题：

（1）限制酶能切开RNA分子的磷酸二酯键吗？;;倒转180°，完全相同则为同一种限制酶切割;2.请判断：以下黏性末端是由种限制酶作用产生的。;一、限制性内切核酸酶—“分子手术刀”;写出下列限制酶切割形成的黏性末端

BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________;P75页2．有2个不同来源的DNA片段A和B，A片段用限制酶SpeⅠ进行切割，B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位点如下。;（2）不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端，这在基因工程操作中有什么意义？;中轴线;平末端平末端;【P71旁栏思考题】你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？;【思考】1、要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？;【思考】把两种来源不同的DNA进行重组，应该怎样处理？;缺口怎么办？;1.作用：;两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来;CTTCATG;可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;（2）T4DNA连接酶可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，效率低;E·coliDNA连接酶与T4DNA连接酶比较：;;与DNA相关的五种酶的比较;1.作用：;（1）能够在宿主细胞中稳定保存并复制、表达

（2）有一个至多个限制酶切点

（3）有某些标记基因

（4）对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。;λ噬菌体的衍生物或某些动植物病毒作为运载体利用的原理是

.病毒对宿主细胞的侵染具有一定的性。;普通的细菌一般是对抗生素______（敏感/不敏感）的，在含有青霉素或四环素的培养基中______（能/不能）生长。如果给普通细菌导入一个含有四环素抗性基因的质粒，四环素抗性基因的____________可使细菌获得抵抗四环素的性状。;AATTCGGCATAC…;AATTCGGCATAC…;选必三P73;;下图是一个DNA片段，箭头处代表不同限制酶的切点，据图回答：;一、概念检测

1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是

A．能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键

B．能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键

C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D．只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，不能连接双链DNA片段的平末端

2．在重组DNA技术中，将外源基因送入受体细胞的载体可以是（）

A．大肠杆菌的质粒B．切割DNA分子的酶

C．DNA片段的黏性末端D．用来识别特定基因的DNA探针;随堂练习;1.若某链状DNA分子中含有两个HindⅢ的识别序列，该DNA分子将被切成几个片段，断裂几个磷酸二酯键？;下图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图。据图回答下列问题。