细胞工程第一次课.pptVIP

*愈伤组织外植体经过培养所形成的脱分化的植物细胞团称为愈伤组织。在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。第30页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*形态发生植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。植物的离体体细胞胚胎发生指各种外植体、培养细胞、原生质体在培养条件下形成胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞统称为体细胞胚或胚状体）的过程。第31页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*2.植物细胞全能性的实现条件与过程条件：使植物细胞处于体外条件下（解除植株其余部分的影响）一定的营养物质和培养条件，适当的刺激第32页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*外植体愈伤组织生长点根、芽或胚状体小植株脱分化再分化器官发生营养生长过程胚胎发生第33页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*3.植物组织/细胞培养的营养要求和培养条件（1）培养基成分无机盐碳源和能源维生素氮源生长调节剂诱导子第34页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*MS组成配制1升（1000毫升）培养基硝酸铵1.65克硝酸钾1.9克氯化钙0.44克硫酸镁0.37克磷酸二氢钾0.17克碘化钾0.83毫克硼酸5.2毫克硫酸镁22.3毫克硫酸锌3.6毫克钼酸钠0.25毫克硫酸铜0.025毫克氯化钴0.025毫克硫酸铁27.8毫克蔗糖30克琼脂7克。其他生长调节物质要根据花卉的种类和培养目的而确定第35页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*（2）培养条件要求光照：强度、光质和光周期湿度：容器内的湿度几乎是100%的相对湿度，二是环境的相对湿度一般要求70～80%。温度：通常24-28℃pH值：5.6-6.0之间气体渗透压第36页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*4.植物组织培养五阶段预备阶段：培养室、培养容器、接种工具的准备，培养基制备，选择合适的外植体、表面杀菌。诱导去分化阶段：接种，外植体在含有生长素类激素的培养基中形成愈伤组织（光照非必需）继代增殖阶段：将愈伤组织移植到含有细胞分裂素的培养基中，愈伤组织细胞数大大扩增生根发芽阶段：将愈伤组织移植到含有细胞分裂素的培养基中，使其重新分化成胚状体，继而长成小植株（光照必需）移栽成活阶段第37页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*第38页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三关于细胞工程第一次课*第1页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*第一节细胞工程概述一、细胞工程概念细胞工程是指以细胞作为研究对象，应用细胞生物学和分子生物学的原理与方法，在细胞水平上进行的操作，按照人们的意志设计改造细胞的某些遗传性状，从而培育出新的生物改良品种或通过细胞培养获得自然界中难以获得的珍贵产品的新兴生物技术。第2页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*二、细胞工程发展史上的主要事件1902年，Haherlandt预言了植物细胞的全能性；1907，美国Harrison培养了蛙胚神经组织；1934，荷兰温特发现生长素；1960，英国诺丁汗大学科金教授使用酶解方法从番茄幼苗根部制备得到大量原生质体；1972，美国卡尔森等用NaNO3为融合诱导剂，将来自不同种的烟草原生质体进行融合，获得世界上第一个体细胞杂种植株；1977，英国胚胎工程技术，首例试管婴儿；1997，多莉克隆羊；2001，首例克隆猪…第3页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*第4页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*第5页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*1927-2002赛瑟·米尔斯坦CésarMilsteinGeorgesK?hler1946-1995乔治·可雷尔第6页，讲稿共54页，2023年5月2日，星期三*第二节细胞工程的基本技术细胞工程的分类①按遗传操作的对象结构层次分细胞工程染色体工程染色体组工程细胞质工程