色谱分析法概论.pptVIP

*93-*色谱过程方程式能说明什么问题？K、Vs在各种色谱中的含义是什么？凝胶色谱法中的K与其他机制色谱的K有何不同？凝胶色谱K仅与待测分子大小尺寸、凝胶孔径大小有关；而其他三种K值都受组分、流动相和固定相的性质以及柱温的影响。*93-*由分离度公式可看出，弱将二组分有效分离:足够的保留时间差，与热力学K值有关色谱峰宽足够小，与色谱的动力学过程有关色谱理论主要包括热力学和动力学两个方面：塔板理论：platetheory速率理论：ratetheory计量置换理论：耿信笃《计量置换理论及应用》，科学出版社，2004.17.3色谱法的基本理论*93-*1952年由Martin和synge提出。“塔板”是从精馏中借用的，是一种半经验理论，但它成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布，并引入塔板数作为衡量柱效的指标。一、塔板理论（Platetheory）此科研技巧：移植和转移*93-*组分在一小段色谱柱长度H内可以在两相中瞬间达到分配平衡，H称为理论塔板高度（HETP）流动相进入色谱柱是间歇式，每次进入一个塔板体积；试样和新鲜流动相都加在第0号塔板上，且试样纵向扩散可忽略；分配系数在各塔板均为同一常数。1、塔板理论的假定条件*93-*塔板理论的假设实际上是把组分在两相之间的连续转移过程分解为间歇在单个塔板中的分配平衡过程。经N次转移后，第r号塔板中溶质的质量分数为：2、质量分配和转移说明：经过多次塔板转移可以实现富集分离。实际上色谱柱的塔板数为103～106以上，组分在分配系数上的微小差别，也可获得良好的分离效果。*93-*设流动相的线速度为u，组分的移行速度为v3、K、k和保留时间的关系色谱过程方程式：*93-*保留因子：表示组分在色谱体系中多停留的时间（或在固定相中的时间）与死时间的比值;当色谱体系一定时，Vs、Vm一定，则k或K值越大，tR、tR越长。色谱过程方程式：表示了保留时间与K值的关系;*93-*设A、B混合物组分能被色谱柱分离，则有：tR（A）＝t0（1＋KAVs/Vm）tR（B）＝t0（1＋KBVs/Vm）两式相减，得ΔtR＝tR（A）－tR（B）＝t0（KA－KB）Vs/Vm色谱分离的前提是：KA≠KB，或kA≠kB4、色谱分离的前提亦即：70%CH3OH+30%H2O60%CH3OH+40%H2O50%CH3OH+50%H2O40%CH3OH+60%H2O1：9,10-蒽醌；2：2-甲基-9,10-蒽醌；3：2-乙基-9,10-蒽醌4：1,4-二甲基-9,10-蒽醌；5：2-特丁基甲基-9,10-蒽醌；调整k、K使分离最佳的有效途径之一：改变流动相组成调整k、K使分离最佳的有效途径之二：程序升温(GC)和梯度洗脱(LC)。由于分析物组成复杂，某种流动相有时难以使所有组分获得满意分离*93-*一、色谱法的分类1、按两相的状态分类气相色谱：GSC、GLC；液相色谱：LSC、LLC；超临界流体色谱：SFC2、按色谱运行操作的形式分类柱色谱：填充柱色谱、微填充柱色谱毛细管柱色谱、开管柱色谱等平面色谱：薄层色谱、纸色谱、薄膜色谱16.2基本类型色谱方法及其分离机制*93-*3、按用途分类分析型色谱：制备型色谱：流程色谱：4、按组份在固定相上的分离机制分类：吸附色谱：分配色谱：离子交换色谱：体积排阻色谱：亲和色谱：电泳色谱、电色谱：*93-*色谱分离机制不同，其体系构成也不同*93-**93-*二、分配色谱法（PartitionC）1、PC分离机制分配平衡原理：利用组分在流动相和固定相间溶解度的动态差别实现分离。问题思考：与萃取原理和过程有何异同？K值与哪些因素有关？*93-*2、PC固定相和流动相固定相?液体固定相如何固定？涂渍：将其涂渍在惰性载体上，即固定液键合：将相应具有分配作用的基团通过化学反应键合到载体上，形成化学键合相固定相载体要求：惰性，性质稳定，不与固定相和流动相发生化学反应；流动相?气液色谱：惰性气体液液色谱：与固定相不相混溶，极性大小，可单一，可混合。*93-*正相和反相分配色谱正相分配色谱：固定相极性＞流动相极性反相分配色谱：固定相极性＜流动相极性PC的洗脱顺序：气液分配：与固定相极性，组分沸点与极性相关液液分配：正相色谱—按极性先弱后强顺序反相色谱—按极性先强后弱顺序*93-*