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2022/12/7 浙江省非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测专家共识浙江省抗癌协会抗癌药物专业委员会专家组(发布时间：2016-04) 浙江省非小细胞肺癌血液EGFR基因突变检测专家共识 浙江省抗癌协会抗癌药物专业委员会专家组(发布时间：2016-04) 肺癌是目前我国发病率及死亡率最高的肿瘤，早期诊断、精准治疗、监测复发和转移，对提高肺癌的整体治疗水平和治疗效果尤为重要。非小细胞肺癌(NSCLC)约占所有肺癌的80%～85%，以表 皮生长因子受体(EGFR)为靶点的小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKI)为晚期NSCLC的治疗带来了新的曙光；而EGFR基因突变状态是决定EGFR-TKI疗效最重要的预测因子，检测EGFR基因的突变状态是 决定患者是否能够应用EGFR-TKI治疗的先决条件[1]。 肿瘤组织样本(手术、活检、细胞蜡块)是检测晚期NSCLC EGFR突变状态最适合的样本来源。然而并非所有患者都能提供足够的组织样本，可通过经支气管镜、经皮肺穿刺活检或胸腔积液标本来进 行突变检测，但仍不能覆盖所有晚期患者[2-3]。在IFUM研究中，仅19%的入组患者能够检测到肿瘤EGFR突变状态，无法检测的原因包括：无法活检，肿瘤组织样本的质量不合格或所含肿瘤细胞 数量不够等[4] ；组织标本存在空间和时间的异质性也给肿瘤基因的精准检测带来了极大的挑战。而近年来的研究显示存在于外周血中的游离肿瘤DNA(ctDNA)与肿瘤组织基因组DNA具有极为相似 [5-6] [7] 的遗传学特性 ，且在肿瘤患者中外周血ctDNA含量显著高于健康人群。数据显示血液EGFR检测水平已经接近组织检测的水平，配对样本检测一致性在60%～95%之间 。2014年9月欧洲药 品管理局已批准可采用ctDNA标本来评估EGFR突变状态。中国国家食品药品监督管理局(CFDA)在2015年2月也已批准Gefitinib说明书更新，在推荐所有NSCLC患者的肿瘤组织都应进行EGFR突变 检测基础上，补充了如果肿瘤标本不可评估，则可使用从血液(血浆)标本中获得的ctDNA。 血液ctDNA EGFR检测具有无创、便捷、实时可获取的特点能在一定程度上帮助解决组织样本量不足、异质性及反复动态活检的问题。但目前血液ctDNA EGFR检测尚存在临床应用范围、适用人 群、检测方法等方面标准的不统一，如何有效合理的应用血液EGFR检测已成为临床上亟待解决的问题。2015年5月，浙江省抗癌协会抗癌药物专业委员会在杭州组织我省相关领域专家反复讨论了 针对目前血液检测临床应用的几个重点问题，并就浙江省NSCLC血液EGFR基因突变检测的每个问题逐一讨论并形成共识，具体如下： 1 哪一种方法更加适合血液样本的EGFR检测 目前已有许多血液EGFR基因突变检测方法的报道，如高分辨熔点曲线分析法(HRM)、变性高效液相色谱技术(DHPLC)、突变扩增阻遏系统(ARMS法)、数字PCR方法等[8-10]。不同血浆游离核酸E GFR检测方法各有优势和劣势。 HRM利用不同长度DNA序列具备不同溶解曲线特性，扩增后直接运行高分辨溶解完成对样本的突变分析，操作简单。然而其只能分析纯度单一的小片段DNA，并要求有足够的PCR模板才能得到稳 定可靠的结果。DHPLC基于发生错配的杂合与完全匹配的纯合双链DNA解链特征差异分离。但DHPLC不能检测突变类型，结果判读容易出错，并且多个检测步骤增加了工作量 [11]。数字PCR在血 浆EGFR突变检测上具有较高的灵敏度和特异度[12-13] ，但目前报道的该方法检测EGFR突变位点相对有限(19外显子缺失，21号外显子L858R突变以及20号外显子T790M突变)，仍处在摸索、累积 经验阶段；其对操作人员和环境均有较高的要求，未来应用于临床尚需大规模临床数据验证。以二代测序技术(NGS)为代表的新技术扩展了基因突变检测的深度和广度[14] ，但其临床转化应用更需 要海量数据积累。 目前成熟且常用检测血液EGFR基因突变的方法是ARMS法，相比于肿瘤组织EGFR检测，该方法检测血浆EGFR敏感型突变的灵敏度在65%