多参数流式细胞术检测急性白血病及浆细胞肿瘤微小残留病中国专家共识(2017年版)中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组(发布时间：2017-12).pdfVIP

2022/12/6 多参数流式细胞术检测急性白血病及浆细胞肿瘤微小残留病中国专家共识(2017年版)中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组(发布时间：2017-12) 多参数流式细胞术检测急性白血病及浆细胞肿瘤微小残留病中国专家共识(2017年版) 中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组(发布时间：2017-12) 多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry，MP-FCM)是运用不同荧光标记的多种抗体组合对造血细胞表面或胞内抗原的表达状况进行检测，进而对细胞的系列来源、分化程度、表型异常与否进 行分析判断的高通量、高敏感性检测技术，其在恶性血液病的诊断分型、治疗监测、预后评估及治疗靶点筛查中已成为必不可少的实验诊断手段[1-2]。微小残留病(minimal residual disease，MRD)是指 恶性血液病经过治疗达到血液学完全缓解后体内残存的通过形态学等传统方法无法检测到的任何水平的微量肿瘤细胞状态[3-4]。近年来，也有学者根据现有检测技术的局限性将MRD定义为可检测的残留病 (measurable residual disease)。运用FCM检测恶性血液病MRD的研究始于20世纪80年代，利用2～4色FCM对急性白血病的治疗后样本进行检测，并基于在正常细胞分布之外的“空白”区域检测到异常 表型的理论对MRD进行分析鉴别[5-6] ；在过去的10年中，随着FCM水平的不断提高，特别是8～10色MP-FCM在MRD检测中体现出敏感性高、特异性好、适用范围广的优势，MRD的FCM检测从小规模 样本的临床研究发展到大规模样本的临床验证，目前已成为恶性血液病临床疗效判断和预后分层的重要依据，而基于MRD指导下的个体化治疗可以使不同危险度分层组中的患者避免过度治疗或治疗不足， 以提高患者的长期生存率[7-9]。 然而，由于白血病等恶性血液病存在不同程度的克隆异质性、不同治疗方案对免疫表型和克隆筛选的影响、化疗后不同时间点骨髓造血恢复的状况不一、不同基因背景的残留肿瘤细胞在复发时的增殖动力 学不同等疾病自身因素的复杂性，以及不同检测中心在抗体组合、荧光搭配、样本处理、圈门策略、分析逻辑、主观经验、质控管理等诸多技术环节中的差异，目前国内外对于MRD的检测和分析还缺乏规 范化，导致对MRD检测结果的临床解读和预后评估标准存在不一致性。为了使国内各检测中心对于MRD的FCM检测和分析逐步实现规范化和标准化，在可控因素范围内尽量减少检测结果之间的差异，中 国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组通过各种学术讨论、多中心室间比对等一系列努力，形成了基于MP-FCM检测MRD的国内共识，供大家参考，也希望在此基础上不断完善，以期提高我国恶性 血液病MRD检测的整体水平。本共识涉及病种包括急性髓系白血病(aute myeloid leukemia，AML)、急性T淋巴细胞白血病(T-cell precursor acute lymphoblastic leukemia/lymphoma，T-ALL)，急性 B淋巴细胞白血病(B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia/lymphoma，B-ALL)和浆细胞肿瘤(plasma cell neoplasms，PCN)。 一、MRD检测原理及方法 (一)MRD检测原理 FCM检测MRD的原理是通过分析细胞表面或胞内一系列抗原的表达模式来识别只在白血病细胞中出现而正常骨髓中不存在或存在比例极低的免疫表型，即“白血病相关免疫表型”(leukemia-associated i mmunophenotypes，LAIP)。根据抗原表达特点将LAIP分为以下几种表现形式：跨系抗原表达、非同步抗原表达、抗原表达量异常、散射光信号异常以及表达少数白血病特异性抗原(如NG2)。跨系抗原是 指某一系列的细胞表达其他系列的抗原，如B-ALL的白血病细胞中表达髓系抗原CD66C、CD13、CD33等；非同步抗原表达是指应该分别出现在分化早期和晚期的抗原同时出现，如AML中CD11b(晚期)和 CD34(早期)共表达；抗原表达量异常指与同系列、相同分化阶段的正常造血细胞比较，白血病细胞中某些抗原的表达强度明显异常，包括减低(low expression，low)、缺失或升高(bright expression，br i)，如正常CD19+CD34+B系原始淋巴细胞应该