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Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+等。 记着: 1、凝集与絮凝的差别: 凝集是指在电解质作用下,因为胶粒之间扩散双电层电位降落,电排挤作用降低,损坏胶体系统的分别状态,使之不稳固互相凝集成1mm左右块状凝集体的现象。絮凝指在某些高分子絮凝剂的作用下,鉴于架桥作用,使胶粒交联成团、形成10mm大小的较大絮凝团的过程。采纳凝集方法获取的凝集体,其颗粒是比较细 小的,有时还不可以有效的进行分别。采纳絮凝法例能够形成粗大的絮凝体,使发酵液较简单分别。 常用的凝集剂电解质有:硫酸铝Al2(SO4)3?18H2O(明矾);氯化铝AlCl3?6H2O; 三氯化铁FeCl3; 硫酸亚铁FeSO4·7H2O; 石灰;ZnSO4;MgCO3 当前最常有:聚丙烯酰胺类絮凝剂 Fe3+的去除可加黄血盐使其形成普鲁士兰积淀而除掉。 4Fe3++3K4Fe(CN)6=Fe4[Fe(CN)6]3↓+12K+ 记着:杂蛋白的去除方法 积淀法包含:等电点积淀法蛋白质的等电点多半在酸性范围内(pH4.0~5.5),调理发酵液的pH到蛋白质的等电点是除掉蛋白质的有效方法。和酸碱调理,使蛋白质与离子形成积淀 在酸性溶液中,蛋白质与一些阴离子形成积淀,如三氯乙酸盐、水杨酸盐、苦味 酸盐等; 在碱性溶液中,蛋白质与一些阳离子形成积淀,如 变性:加热,大幅度调理pH值,加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。 吸附法:加入某些吸附剂或积淀剂吸附杂蛋白质而除掉。 记:板框过滤机过滤过程 板框过滤机的操作是间歇式的,每个操作循环由装合、过滤、清洗、卸渣、整理五个阶段。 、装合: 将板与框按1-2-3-2-1-2-3的次序,滤板的双侧表面放上滤布,而后用手动的或灵活的压紧装置固定,使板与框密切接触。 、过滤: 用泵把滤浆送进右上角的滤浆通道,由通道流进每个滤框里。滤液穿过滤布沿滤板的凹槽流至每个滤板下角的阀门排出。固体颗粒积蓄在滤框内形成滤饼,直到框内充满滤饼为止。 、清洗: 将洗水送入洗水通道,经清洗板左上角的洗水入口,进入板的双侧表面的凹 槽中。而后,洗水横穿滤布和滤饼,最后由非清洗板下角的滤液出口排出。在此阶段中,清洗板下角的滤液出口阀门封闭。 、卸渣、整理 翻开板框,卸出滤饼,清洗滤布及板、框。 记:细胞破裂(cellrupture)技术是指利用外力损坏细胞膜和细胞壁,使细胞内物质包含目的产物成分开释出来的技术。 细胞壁构造对破裂的影响 微生物细胞和植物细胞外层均为细胞壁,细胞壁里面是细胞膜,动物细胞没有细胞壁,仅有细胞膜。 往常细胞壁较坚韧,细胞膜柔弱,易受浸透压冲击而破裂,所以细胞破裂的阻力主要来自于细胞壁。 不一样细胞壁的构造和构成不完整同样,故细胞壁的机械强度不一样,细胞破裂的难易程度也就不一样。 记:细胞破裂方法及原理:机械破裂法、物理破裂法、化学浸透法、酶溶法 记:海涵体复性(间歇式流加稀释复性法)观点? 记:目标蛋白的复性原理:原理:在变性剂溶液中,溶解的蛋白质呈变性状态,即蛋白质高级构造被损坏,但一级构造和共价键没有损坏。当部分变性剂被除掉后,蛋白质会从头折叠成拥有活性的正确构型,该过程称复性。记;盐析的影响要素:2)离子种类 在同样离子强度下,盐的种类对蛋白质溶解度的影响有必定差别,一般的规律为: 半径小的高价离子的盐析作用较强,半径大的廉价离子作用较弱 阴离子盐析成效: 柠檬酸>PO43->SO42->CH3COO>-Cl->NO3->SCN-阳离子盐析成效: NH4+>K+>Na+>高价阳离子 阴离子的影响大于阳离子 四环素的积淀提取 四环素由链丝菌发酵获取 四环素等电点pI=5。当溶液的pH等于等电点时,四环素易从水溶液中积淀出来(游离碱),所以可用于四环素的提取。 四环素又能与尿素形成1:1的复盐,从水溶液中积淀出来,该复盐溶于有机溶剂时,即分解成四环素和尿素。 四环素与尿素的这一反响拥有特异性:金霉素,土霉素都不可以与尿素形成复合物积淀。利用这一性质,可精制四环素。 记:料液:在溶剂萃取中,被提取的溶液, 溶质:此中欲提取的物质, 萃取剂:用以进行萃取的溶剂, 萃取液:经接触分别后,大多半溶质转移到萃取剂中,获取的溶液,余液:被萃拿出溶质的料液。 记:溶剂萃取法的特色 萃取过程有选择性 能与其余步聚相当合 经过相转移减少产品水解 合用于不一样规模 传质快 周期短,便于连续操作 毒性与安全环境问题 记: 记:双水相萃取的长处 1、使固液分别和纯化两个步骤同时进行,一步达成; 2、适合热敏物质的提取,主假如胞内酶; 3、亲水性聚合物加入水中,形成两相,在这两相中,水分都占大比率(70~90%),这样生物活性蛋白质在两相中不会失活,且以必定比率分派于两相中;4、分相时间短,5~15min; 5、设施投资少,操作简单,易于工程放大和连续操作; ⑥不存
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