除菌过滤验证细菌截留试验演示文稿.pptVIP

有效挑战浓度 过滤后应该 过滤器测试膜每平方厘米表面达到至少107 个微生物 均匀分布于膜的表面是最理想的 挑战浓度 (cfu/mL) 和挑战水平 (cfu/cm2)….是不同的，不可混淆 当前第29页\共有49页\编于星期三\12点 有效的挑战水平 最低挑战水平应为每平方厘米膜表面至少 107 cfu B. diminuta (或生物负荷) 基于Bowman对0.45 μm过滤器的观察 Bowman et al., J. Pharm. Sci., 56: 222 (1967) 0.45 μm 过滤器截留数量 104-106 cfu/cm2 检查过大的孔 “除菌级”的定义 当前第30页\共有49页\编于星期三\12点 聚集 单分散性的细胞最适用于挑战 用光学显微镜甄选菌株 使用超声波/振动使其散开 通过光学显微镜和存活计数予以确定 使用 0.45 μm过滤器作为过滤器挑战测试中的阳性对照措施。 当前第31页\共有49页\编于星期三\12点 测试微生物的活性 确认挑战液体中微生物的活性 药物产品或替代物 微生物必须在整个挑战测试的过程中是存活的 如果损失了10倍的微生物，可能就不适合采用直接接种法来进行挑战测试。 挑战前后确定活性 使用可接受的微生物学方法，如 标准平板计数，用于上游分析 方法必须经过验证 (暗示) 使用相同的培养基分析滤出液中细菌存在的情况。 Section 6.9/6.11 当前第32页\共有49页\编于星期三\12点 抑菌/杀菌/非分散溶液 由于直接接种法是理想的 由于测试微生物活性的一些问题，一个成功的测试计划可能需要改变 挑战液体 挑战条件 或两者兼有 可能需要预处理过滤器 文件给出了定义毒性水平的指南 当前第33页\共有49页\编于星期三\12点 2. 直接法 可存活的 微生物? 否 改变 产品/过程 预处理过滤器 B. Diminuta / 挑战微生物 泵 测试过滤器 抗生素 防腐剂 温度 pH 1 2 药品 化验滤出液 中的微生物 当前第34页\共有49页\编于星期三\12点 产品或过程的改变:抑菌/杀菌溶液 概述 决策过程一般不能被很好地理解。 图2 给出了大概的指南 首选始终是直接接种法。 第二个选择是改变产品/过程。 预处理过滤器需要与改变产品/过程结合起来进行。 文件提供了关于定义毒性水平的指南 (毒性大于 1 log) 文件没有试图把改变产品或程序的方法区分优先次序 必须科学地使决策合理化。 Section 6.15 当前第35页\共有49页\编于星期三\12点 Celebrating over 65 Years of Connecting People, Science and RegulationSM Sterilizing Filtration of Liquids Technical Report No. 26 (2008 Revision) 除菌过滤验证细菌截留试验演示文稿 当前第1页\共有49页\编于星期三\12点 第 6.0部分 – 除菌过滤器的验证 / 细菌的截留 6.1 影响微生物截留的因素 6.2 细菌截留验证研究需要考虑的方面 6.3 挑战细菌的选择 6.4 培养的保持 6.5 培养条件和标准 6.6 有效挑战浓度 6.7 挑战水平 6.8 聚集 6.9 培养物的生存能力 6.10 挑战试验方法 6.11 试验用微生物的生存能力 6.12 试验步骤和方案 6.13 非杀菌过程和液体 6.14 替代液体 6.15 杀菌液体 6.16 过滤介质vs.装置 6.17 压力/流量 6.18 持续时间 6.19 下游取样 6.20 试验用膜的选择 6.21 结果的解释 6.22 产品的生物负荷 6.23 过滤器构造的改变 目 录 当前第2页\共有49页\编于星期三\12点 除菌级性能的基本解释 除菌过滤是在对产品没有不良影响的前提下从流动的液体中去除微生物的过程。 ASTMF 838-05 是一种标准的内置TM，可以用于比较所有灭菌级的膜。 证明能去除一种标准试验细菌(Brevundimonas diminuta) 最低浓度为107 cfu/cm2 这是一个很好的开始，但是还要考虑其他因素 当前第3页\共有49页\编于星期三\12点 重要参考 – ASTM F 838-05 ASTM 标准 F838-05, “决定液体过滤器过滤膜细菌截留性能的标准测试方法”, 宾州Conshohocken美国测试和材料协会 ASTM 委员会 D19(2005) 当前第4页\共有49页\编于星期三\12点 除菌级表现的基本定义 2008 版 TR 26 进一步描述了过滤器验证需要考虑的方面除菌过滤器验证要考虑的两个重要因素: 通过适当的标准试验或同等的方法进