SNT 2206.3-2009化妆品微生物检验方法 第3部分：肺炎克雷伯氏菌.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2206.3—2009化妆品微生物检验方法第3部分：肺炎克雷伯氏菌Determination of microbiological in cosmetics-Part 3 :Klebsiella pneumoniae2009-02-20 发布2009-09-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2206. 3--2009前 言SN/T2206《化妆品微生物检验方法》分为以下部分：第1部分：沙门氏菌；第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌；第3部分：肺炎克雷伯氏菌；第4部分：链球菌；第5部分：肠球菌。本部分为SN/T2206的第3部分。本部分的附录 A为规范性附录。本部分由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本部分主要起草人：许龙岩、胡科锋、刘静宇、易敏英、杨捷林、翁文川、凌莉、阳静、袁幕云、陈碧玲。本部分系首次发布的出入境检验检疫标准。 SN/T 2206. 3-2009化妆品微生物检验方法第3部分：肺炎克雷伯氏菌1范围SN/T2206的本部分规定了化妆品中肺炎克雷伯氏菌的检验方法。本部分适用于化妆品中肺炎克雷伯氏菌的检验。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T2206的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本部分。总则化妆品微生物标准检验方法GB/T 7918.13材料和设备3.1吸管:2.0mL和10.0mL,分刻度0.1mL。3.2三角瓶:150 mL,250 mL3.3培养血：直径90 mm。3.4接种针、接种环。3.5载玻片。3.6样品处理器具：镊子、剪刀、勺子3.7 天平:0 g～600 g,感量 0.1g。，均质器：转速1000r/minj以上3.83.9恒温培养箱：36℃±1℃。3.10高压灭菌器。VITEK全自动微生物鉴定系统或类似设备。3.11注：VITEK是由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对该产品的唯一认可。如果其他等效产品具有相同的效果也可使用这些等效产品。4＇培养基和试剂4.10.85%生理盐水。4.2SCDLP液体培养基（见附录 A 中第 A.1 章）。4.3胆硫乳琼脂(DHL)（见附录 A 中第 A.2 章）。4.4营养琼脂斜面培养基（见附录 A中第 A.3章）。4.5动力半固体琼脂（见附录 A中第A.4章）。4.6氧化酶试剂（见附录 A中第 A.5章）。4.7API20E生化鉴定试剂条或其他等效产品。注：API20E生化鉴定试剂条是由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的唯一认可。如果其他等效产品具有相同的效果，也可使用这些等效产品。1 SN/T 2206.3—20094.8 GN 测试卡。注：GN测试卡是由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的唯一认可。如果其他等效产品具有相同的效果，也可使用这些等效产品。5方法提要化妆品中肺炎克雷伯氏菌检验方法是通过增菌、分离、生化鉴定对化妆品中可能存在的肺炎克雷伯氏菌进行定性检验。6检验程序肺炎克雷伯氏菌检验程序见图1。检样10g/mL制成1:10样品稀释液取 10 mL90 mL SCDLP增菌液36℃±1℃培养 18 h ～ 24 h选择性培养基 DHL 平板36 ℃±1 ℃培养 18 h ～ 24 h染色镜检氧化酶试验动力试验API-20E、VITEK或按表1进行生化试验报告结果图1样品制备/化妆品中不同类型的检样制备参照GB/T7918.1进行制样。8操作步骤8.1取1：10样品稀释液10mL接种到90mL SCDLP液体培养基中，置36℃±1℃培养18h～24h。8.2自上述培养液中,取（1～2)接种环，划线接种于胆硫乳琼脂平板（DHL）)中，置 36℃土1℃培养18h～24 h。在DHL平板上肺炎克雷伯氏菌菌落呈淡粉红色，大而隆起，光滑湿润，粘液状，相邻菌落容易融合成脓汁样,接种针挑取菌落时呈丝状粘连。8.3从DHL平板上至少挑取5个典型或可疑菌落,如果平板上可疑菌落少于5个，则全部挑取，把挑取的可疑菌落分别穿刺于动力半固体琼脂,并接种到营养琼脂斜面培养基,36℃士1℃培养18h～24h。8.4将8.3中营养琼脂斜面培养基上的纯培养物做革兰氏染色、氧化酶试验。无动力，革兰氏染色阴性，氧化酶试验阴性者，用 API 20E生化