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B 15 中华人民共和国农业行业标准NY/T 404—2000脱毒生姜种姜(苗)病毒检测技术规程Rules for virus detection of virus-freeseed (seedling) ginger2000-09-22 发布2000-12-01实施中华人民共和国农业部‧发 布 NY/T 404-—2000前 言为了有效地实施对脱毒生姜种姜质量检验和管理,规范脱毒生姜种姜市场,促进生姜脱毒技术的推广,实现脱毒生姜种姜(苗)病毒检测的规范化、标准化,特制定本规程。本规程在参照国内外生姜病毒检测技术必威体育精装版研究进展的基础上,结合当前国内生产实际,力求达到快速、准确、可操作性强的检测要求。检测对象主要选择生产上发生分布范围广、危害性大的病毒。检测方法主要采用斑点酶联免疫吸附检测。本规程内容包括脱毒生姜种姜(苗)病毒检测的适用范围、检测对象、抽样方法、检测方法和质量要求。本标推由中华人民共和国农业部提出。本标准主要起草单位:农业部植物脱毒种苗质量监督检验测试中心(济南)、山东省植物保护总站。本标推主要起草人:孙作文、任宝珍、李明立、杨勤民、王同伟、商明清。 中华人民共和国农业行业标准脱毒生姜种姜(苗)病毒检测技术规程NY/T 404—2000Rules for yvirus detection of virus-freeseed (seedling) ginger1范围本标准规定了脱毒生姜种姜(苗)的病毒检测方法和操作规程。本标适用于脱毒生姜种姜(苗)的病毒检测。2 引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。NY/T 402—2000脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测技术规程3 定义本标准采用下列定义。3.1脱毒苗应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗,经检测确认不带烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV),才确认是脱毒苗。3.2脱毒种姜从繁殖脱毒苗开始,经逐代繁殖增加种姜数量的种姜生产体系生产出来的。分原原种、原种、生产用种三个级别。 pre-elite3.2.1原原种用脱毒苗在防虫网室、温室条件下生产出的符合质量标准的种姜。3.2.2 原种 elite用原原种作种姜,在良好隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。3.2.3 生产用种 certified seed用原种作种姜,在隔离条件下生产出的符合质量标准的种姜。3. 3病毒病株允许率脱毒种姜繁殖田中病毒病株的允许比率。4检测对象烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV);黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)。5 抽样5.1组培苗抽样中华人民共和国农业部2000-09-22批准2000-12-01实施1 NY/T 404—20005.1.1脱毒核心材料;每株必须检测。5.1.2扩繁苗:随机抽取1%~2%的扩繁苗检测。5.2田间抽样5.2.1原原种和原种抽样:生姜生长前期、中期和后期,在目测全田的基础上,采用五点取样法,抽样数量为0.1 hm²以下200株;0.11~1 hm²500株;超出1hm²面积,划出另一检验区,按本规程规定的面积取样。每株取叶片1~5g,低温保湿存放,24 h内检测。5.2.2生产用种抽样:子姜膨大期,在目测全田的基础上,采用随机取样法,0.1 hm² 以下检验 2 点,每点100株;0.11~~1hm²检验5点,每点100株;1.1~~5hm²检验10点,每点100株;超出5hm²面积,划出另一检验区,按本规程规定的面积取样。取样方法及样品保存同5.2.1。5.3商品种姜抽样没有经过田间检验的种姜必须进行商品种姜检验。5.3.1根据生姜种姜不同存放方式,采用分层设点或随机取样的方法,抽样量见表1。表1种姜抽样数量标准表抽样百分率,%抽样最低数量,kg种姜总量,kg6~10《10 0001003~510 000注;不足抽样最低数量的全部作为混合样品。5.3.2将第一次抽取的样品混合后,进行二次抽样,随机抽取10%的混合样品检测。6检测方法斑点酶联免疫吸附(Dot-ELISA)检测法按NY/T 402—2000中附录A执行。7质量要求凡酶联免疫检测呈阳性反应的为带毒种姜(苗)。原原种:病毒病株允许率是0。原种:病毒病株允许率≤1%。生产用种:病毒病株允许率≤5%。 中华人民共和国农业行业标准脱毒生姜种萎(苗)病毒检测技术规程NY/T 404—2000*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话国标雅出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售版权专有不得翻印H开本880×12301/16 印张1/2字数
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