SN 1131-2002大豆疫霉病菌检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1131—2002大豆疫霉病菌检疫鉴定方法Methods for the quarantine and identification ofphytophthora sojae kaufmann gerdemann2002-08-02 发布2003-01-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T言本标准的附录B是规范性附录，附录A是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人：彭金火、张大凯、金林。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1131—2002引言大豆疫霉病菌引起的大豆疫病是大豆生产中的毁灭性病害之一，是我国对外公布的一类植物检疫危险性病原真菌。该病菌以土壤传播为主。目前世界上的主要大豆输出国，如美国、巴西、阿根廷等，均有大豆疫病的发生和分布，且在输出的商品大豆中经常夹带一定量的土壤。为防止该病菌传入我国，在进境植物检疫时，需规范并正确掌握大豆疫霉病菌的检疫鉴定方法。本标准在制定过程中，总结了多年植物检疫的实践经验，吸收了国际和国内的必威体育精装版研究成果，根据大豆疫霉病菌的土壤传播特性、生物学特性、形态学特征等特征，确定了检疫检测和鉴定大豆疫霉病菌的各项技术要求。 SN/T 1131—2002大豆疫霉病菌检疫鉴定方法1范围本标准规定了进出境植物检疫中大豆疫霉病菌的检疫和鉴定方法。本标准适用于大豆夹带土壤中大豆疫霉病菌的检疫和鉴定，同时也适用于大豆疫病已发生地区大豆疫霉病菌的土壤分离和鉴定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所用的修改单（不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T18085—2000植物检疫小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法3原理3.1大豆疫霉病菌的分类地位大豆疫霉病菌(Phytophthora sojae Kaufmann Gerdemann,异名 P.megasperma f. sp. glycineaKuan Erwin和P.megasperma Var.sojae Hildebrand)属鞭毛菌亚门(Mastigomycotina），卵菌纲（Oomycetes），霜霉目（Peronosporales），腐霉科（Pythiaceae），疫霉属（Phytophthora），可侵染任何生育阶段的大豆寄主，包括根、茎、叶、豆荚和种子，但以引起大豆根腐病和茎腐病较为普遍，英文名：Soy-bean Phytophthora stem and root rot,简称大豆疫霉病。3.2检疫原理该病原真菌是典型的土壤习居菌，主要以抗逆性很强的卵孢子在土壤中和土壤中的寄主残体内越冬并长期生存。当田间温度和湿度适宜时，卵孢子打破休眠萌发，产生孢子囊。雨后或灌溉后有积水时，孢子囊很快释放出大量游动孢子，游动孢子被雨水冲溅到寄主表面，或受寄主分泌物的吸引，朝根系游动并最终侵染寄主。有水时，在寄主根部外表形成大量孢子囊，在内部形成大量卵孢子。本标准根据病原菌的这一特性，先收集土壤并在适宜条件下培养一定时间，使卵孢子萌发产生孢子囊，然后加水浸泡，使孢子囊释放出游动孢子，再加感病大豆品种的叶碟诱集游动孢子，待游动孢子侵染叶碟并在叶碟边缘（偶尔在叶碟表面）产生新的孢子囊并释放出游动孢子时，即可进行病原菌的分离和鉴定。3.3鉴定原理大豆疫霉病菌的生物学特性、形态学特征等与其他疫霉种不同，是鉴定该病原菌的依据。4仪器设备4.1生物显微镜（具油镜镜头）4.2目镜和镜台测微尺具透射光源的体视显微镜（最大放大倍数不低于50倍）4.34.4干热灭菌器4.5高压灭菌器普通天平（感量1/100)4.6分析天平（感量1/10000）4.7 SN/T 1131—-20024.8超净工作台4.9生物培养箱（具40001x以上的光照）4.10酒精灯4.11铁白4.12医用注射器（10mL）及针头（18号）4.13医用手术剪、镊子4.14烧杯(5mL、50mL、1 000mL)4.15试管（直径12mm）4.16培养皿（直径9cm）4.17载玻片（25.3mm×76.2mm，厚0.8mm）4.18盖玻片(18mm×18mm)4.19三角瓶（250mL）4.20量筒（500mL)4.21滴管4.22Parafilm膜或无色透明塑料袋5·药品5.1抗菌素及杀菌剂5.1.1.苯莱特（benomyl,研究用纯粉剂或市售可湿性粉剂）5.1.2制霉菌素（nystatin，研究用纯粉剂或市售医用内服片剂）5.1