实验十三动物组织核酸的分离鉴定和含量测定.pptxVIP

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实验十三动物组织核酸的分离鉴定和含量测定;动物组织核酸的分离纯化及鉴定;核酸是一类生物高分子化合物,存在于一切生物体内,是组成细胞的重要成分。它以与蛋白质结合的形式——核蛋白存在于细胞中,是生命的基本物质之一,具有储存、复制生物体遗传信息的功能,也是蛋白质合成不可缺少的物质,因此它对于生物体的生长、遗传、变异等现象起着重要的决定作用。核酸分为两大类——核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA) 。 核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖(核糖或脱氧核糖)和磷酸的混合物。核酸部分水解则产生核苷和核苷酸。每个核苷分子含一分子碱基和一分子戊糖,一分子核苷酸部分水解后除产生核苷外,还有一分子磷酸。核酸的各种水解产物可用层析或电泳等方法分离鉴定。 ;DNA和RNA的结构;组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为 β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则为β-D-核糖。;1. 猪肝DNA和RNA的分离;核酸分离的一般步骤;DNA和RNA分离的基本原理;酚:氯仿:异戊醇抽提;实验步骤;2. 核糖和脱氧核糖的显色实验;DNA:1ml SC溶液溶解DNA,然后转移到50ml离心管中,用9ml 0.01M NaOH溶液溶解,4000rpm离心10分钟,上清转移到试管中备用。各取上述1mlDNA溶液于两个试管中,其中一个里面加入3ml地衣酚试剂,然后在沸水中20min,观察颜色反应;另外一只试管中加入2ml二苯胺试剂,60 ℃条件下反应1h,观察颜色反应。 ;RNA:将RNA沉淀用2ml蒸馏水溶解,然后转移至2只试管中,每只1ml。其中一只试管中加入3ml地衣酚试剂,然后在沸水中20min,观察颜色反应;另外一只试管中加入2ml二苯胺试剂,60 ℃条件下反应1h,观察颜色反应。;3. 核酸的定量和纯度测定;二苯胺显色法原理;实验方法;DNA标准曲线的制作和样品测定; DNA含量计算;感谢您的欣赏

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