糖基转移酶和糖苷酶.pptxVIP

糖基转移酶和糖苷酶;第一节 糖基转移酶(Glycosyltransferases);第3页/共112页;第4页/共112页;一、糖基转移酶的命名与分类; 糖基转移酶的命名; ?-1,4-Galactosyltransferase Family; Fucosyltransferase Family ; All members of the sialyltransferase genes cloned;The Evolutionary History of Glycosyltransferase Genes;二、糖基转移酶特性;糖基转移酶特性;Biological Functions of a Soluble Form of N-acetylglucosaminyltransferase V (GnT-V) ;Regulation of High Branching in N-linked Oligosaccharides;第15页/共112页;大鼠不同组织中三种Ｎ-乙酰葡糖胺基转移酶(GlcNAc T); 三、糖基转移酶的结构域; 糖基转移酶的结构域;克隆的哺乳动物糖基转移酶的结构域; 四、糖基转移酶的催化特性与功能; 糖基转移酶的催化特性;不同的糖基转移酶所催化的糖基转移反应不同;人B血型的?1-3半乳糖基转移酶对受体底物的专一性; 糖基转移酶的催化特性; 糖基转移酶的催化特性; 糖基转移酶的催化特性; 五、糖基转移酶同源性和抗原性; 糖基转移酶同源性和抗原性;六、糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;糖基转移酶和疾病;七、糖基转移酶的应用;糖基转移酶的应用;糖基转移酶在糖类合成中的应用 糖类药物在治疗炎症、用作肿瘤疫苗和抗病毒等方面都有其独特的功效。 现在普遍使用的糖类合成方法有两种： 化学合成和酶促合成 化学合成近年来取得一些进展，提出了一种全自动寡糖合成法，但在天然复合产物中以一种糖代替另一种糖仍然困难。 酶促合成的产量高、产物具有特异立体化学异构性。;糖基转移酶的应用;八、O-GlcNAc 糖基转移酶在原核 和真核细胞中的表达和提纯;细胞质和细胞核内的蛋白质O-GlcNAc糖基化和去糖基化分别由O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)和O-GlcNAc 糖苷酶催化。 蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰及其生物学意义目前成了蛋白质翻译后修饰领域最热门的课题之一。 其研究目的： 用原核和真核细胞表达OGT，并用不同的方法从这两个系统提纯重组OGT，获得制备有活性的OGT，用于进行O-GlcNAc糖基酶功能方面的研究。;研究结果;IPTG 诱导重组OGT 在BL 21 大肠杆菌中的表达;大肠杆菌中表达的重组OGT 经S-蛋白质凝胶纯化;研究结果;甜菊糖基转移酶基因的克隆及序列分析;第45页/共112页;The level of expression of plant glycosyltransferases;Transgenic pigs with GnT-III;Recombinant plant glycosyltransferases reported recently (2001–2004);葡糖基转移酶多肽疫苗 HDS免疫大鼠的实验研究;葡糖基转移酶多肽疫苗 HDS免疫大鼠的实验研究;葡糖基转移酶多肽疫苗 HDS免疫大鼠的实验研究;葡糖基转移酶抗体的制备与研究;第二节 糖苷酶;一、糖苷酶的分类;Exo-1-4-Beta-D-Glycanase;第56页/共112页;二、糖苷酶的分布;三、糖苷酶的命名;(1)糖基一侧的专一性 (2)糖苷键的?-?-异头专一性 (3)糖基配基一侧的专一性;四、糖苷酶的生物学功能;第61页/共112页;第62页/共112页;第63页/共112页;Biological Roles of N-glycanase in Cells;第65页/共112页;第66页/共112页;五、一些常见的糖苷酶;一些常见的糖苷酶;水解不同类型糖苷键的糖苷酶;六、糖苷酶的制备方法;绿色木霉产生的外切β-葡聚糖苷酶 从潮湿的树皮及腐烂的木块上采集样本? 加适量的无菌水温和搅拌?取1 ml 悬浊液,分别涂于含有滤纸的固体筛选培养基上?待长出若干菌落后，对生长良好的菌种进行分离?以羧甲基纤维素钠为底物分别测定其所产酶活性。 菌培养液过滤?上清液硫酸铵沉淀?　Sephadex 柱层析?DEAE2纤维素52 阴离子交换柱层析?收集洗脱纯酶液。;一株神经节苷脂内切糖苷酶产生菌的分离 采用神经节苷脂选择性培养基，从土壤微生物中筛选得到一株产神经节苷脂内切糖苷酶的菌株YW2112，该酶能特异性水解神经节苷脂中连接神经酰胺和寡糖链之间的糖苷键，是研究神经节苷脂结构与功能的重要工具酶。;人参糖