ImageJ荧光共定位分析-教程.pdfVIP

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ImageJ 共定位分析的网址,插件需在官网下载保存至安装文件夹。 http://wwwfacilities.uhnresearch.ca/wcif/imagej/colour_analysis.htm#coloc_ica 一:共定位scatter plot 图 (需用Colocalisation Threshold 插件) 1.使用PS 将需要做共定位分析的单个细胞从共染图片中分离出来 2.使用Image J 打开该图片:File--Open 3. 分离荧光通道:Image—Color—Spilt Channels 结果会分离出三个荧光通道(blue green red),示例图中只有两个荧光通道(red green ),所以blue 通道直接删去。 4.作共定位分析 :Plugins—Colocalisation Threshold 会出现下图的窗口,channel1 和channel2 选择好red 和green 通道,勾选show scatter plot,点击ok. 结果出现 Results 和 scatter plot 窗口,其中Rcolor 为 Pearson’s for image above thresholds. 二 共定位的Plot Profile 图 1. 打开需分析的图片,分离荧光通道 Split channels , 再合并荧光通道 Merge channels,点击ok. 出现Composite 窗口,左上角有红色的c1/2 字样即为红色通道,滚动滚轮有绿色的 c2/2 字样此时即为绿色通道。 2. 使用直线工具画一条直线,Analyze—Plot Profile,出现下图 3. 滚动滚轮,在 Plot of Composite 窗口中选中Live, 即可切换到绿色通道的Plot profile . 4.选中List 可得到数据,Edit—copy 可以将原始数据复制到origin 中作图。 5.最后origin 做出下图。

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