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②干热灭菌法 器具: 条件: 适用范围: 干热灭菌箱 玻璃器皿等 160—170℃ 1—2h 第三十一页,共六十页,2022年,8月28日 ③灼烧法: 器具: 条件: 适用范围: 酒精灯 接种环、试管口 涂布器 烧至暗红 接种环烧至暗红 第三十二页,共六十页,2022年,8月28日 (2)消毒的方法 杀死环境中的病原微生物 ①煮沸消毒法: 适用范围: 培养皿、餐具 100℃煮沸5—6min 条件: 第三十三页,共六十页,2022年,8月28日 巴斯德的鹅颈瓶实验 ②巴氏消毒法 第三十四页,共六十页,2022年,8月28日 ②巴氏消毒法: 适用范围: 牛奶的消毒 ③酒精消毒法: 适用范围: 实验者的手臂、实验台 条件: 80℃中15min或70—75℃中30min 75%的酒精 条件: 第三十五页,共六十页,2022年,8月28日 ④紫外线消毒法: 适用范围: 用紫外线照射30min 接种室内空气、接种箱、超净工作台 超净工作台 接种箱 条件: 第三十六页,共六十页,2022年,8月28日 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 (1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 思考: 3、在实验室能吃东西吗?为什么?实验使用后的培养基应当怎样处理? 第三十七页,共六十页,2022年,8月28日 例题.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 A、防止杂菌污染 B、消灭杂菌 C、培养基和发酵设备都必须灭菌 D、灭菌必须在接种前 B 第三十八页,共六十页,2022年,8月28日 四、实验操作 实验目的: 用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.计算 2.称量 3.溶化 4.灭菌 5.倒平板 操作步骤: 第三十九页,共六十页,2022年,8月28日 计算: 计算100mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 0.5g 1.0g 0.5g 2.0g 培养基组分 用量 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 第四十页,共六十页,2022年,8月28日 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 讨论: 第四十一页,共六十页,2022年,8月28日 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 第四十二页,共六十页,2022年,8月28日 第一页,共六十页,2022年,8月28日 到目前为止, 几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关 第二页,共六十页,2022年,8月28日 1、微生物的概念:是指形体微小、结构简单,借助显微镜才能看到的生物。 原核生物: 真菌: 原生生物: 病毒: 2、类群: 一、微生物的简介 细菌、蓝藻、放线菌、支原体等 酵母菌、霉菌、大型食用菌等 变形虫、草履虫等 HIV、噬菌体、烟草花叶病毒、SARS 第三页,共六十页,2022年,8月28日 形态 细菌 第四页,共六十页,2022年,8月28日 结构 第五页,共六十页,2022年,8月28日 芽孢 某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形,厚壁,含水量低,抗逆性强的休眠体构造,称为芽孢。 芽孢最主要的特点就是抗性强,对高温、紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物都有很强的抗性。 第六页,共六十页,2022年,8月28日 第七页,共六十页,2022年,8月28日 整个生物界中抗逆性最强的生命体,在抗热,抗化学药物和抗辐射等方面,十分突出。 例如,肉毒梭菌的芽胞在沸水中要经过5至9.5h才被杀死;巨大芽胞杆菌芽胞的抗辐射能力比E.coli细胞要强36倍。芽胞的休眠能力更为突出,在常规条件下,一般可以保持几年至几十年而不死。据文献记载,有点芽胞甚至可以休眠数百至数千年,最极端的例子是在美国的一块有2500万~4000万年历史的琥珀,至今从其中蜜蜂肠道内还可以分离到有生命的芽胞。 细菌芽孢特点 第八页,共六十页,2022年,8月28日
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